Les notions fondamentales en chromatographie

Résumé du document

La composition d'un échantillon peut être obtenue par analyse chromatographique. Cette dernière donne un chromatogramme constitué de pics qui permettent de caractériser les molécules constitutives de l'échantillon (séparer, identifier et quantifier). Ainsi chaque constituant peut être identifié.

La chromatographie a commencé dans le domaine de la botanie. La chromatographie de partage a été découverte par Martin et Synge. L'évolution de la chromatographie a poursuivi son cours dans le développement technique. En 1975 apparaissent les débuts de la chromatographie ionique. Depuis 1976 les progrès se font sur les phases stationnaires. Les méthodes séparatives sont l'évolution majeure du XXème siècle. (...)

Extraits

[...] L'évolution de la chromatographie a poursuivi son cours dans le développement technique. En 1975 apparaît les débuts de la chromatographie ionique. Depuis 1976 les progrès se font sur les phases stationnaires. Les méthodes séparatives sont l'évolution majeure du XXème siècle /Principes généraux Le système chromatographique Deux phases non miscibles ( phase stationnaire et mobile La phase mobile : Elle circule en permanence à travers la phase stationnaire ( jamais un solide). La phase stationnaire : Elle est immobilisée et peut être liquide (dépôt sur un support solide) ou solide. [...]

[...] L'augmentation de la viscosité du solvant diminue la taille des particules. Si la résolution est trop faible on peut augmenter l'efficacité de la colonne. En augmentant la longueur de la colonne on augmente la durée d'analyse et les pertes de charges. La diminution du diamètre des particules augmente les pertes de charges. Les phénomènes extérieurs à la colonne montrent que réduire au minimum le volume de l'injecteur, du détecteur et des jonctions à pour conséquence un gain de temps de séjour du soluté dans le système. [...]

[...] H = L Influence de la géométrie de la colonne : La longueur de la colonne : L0 =16 H Le diamètre de la colonne : HEPT est trois fois plus grand au voisinage des parois que dans la partie centrale. On détermine un ø de paroi qui a un effet nul et le plus faible possible (Cf. tableau /Optimisation de la durée d'analyse La durée d'analyse est une grandeur qui n'apparaît pas dans les équations thermodynamiques et cinétiques. Le facteur est primordial : Temps analyse = Conclusion : Toute résolution inutile est coûteuse en temps. [...]

[...] 5/La chromatographie d'adsorption Le soluté est soumis à une phase stationnaire et mobile (compétition). Il faut trouver un temps de séjour. L'équilibre qui en résulte aboutit à une migration différentielle des solutés de l'échantillon à analyser ce qui permet leur séparation. Les liaisons intermoléculaires sont liées à la polarité de la phase polaire et apolaire. Pour que cette adsorption soit utilisable à des fins séparatives il faut qu'elle soit réversible. La désorption remet la substance en solution à l'aide d'un solvant approprié pour rupture des liaisons précédemment formées. [...]

[...] Le volume mort est l'espace vide entre les grains du système chromatographique et il est minimisé. Le volume de rétention réduit V'R : C'est le volume de phase mobile qui s'écoule en plus du volume mort pour observer l'élution du soluté. V'R = VR - VM Autres grandeurs de rétention du soluté : Temps de rétention (tR ) ; temps de rétention réduit (t'R) ; distance de rétention et distance de rétention réduit (d'R). Le facteur de capacité K' : Le facteur de capacité est la manière dont le composé est retenu par une colonne. [...]