Caractérisation de la protéine FMRP absente chez les patients atteints du syndrome X-fragile

Résumé du document

Les retards mentaux constituent un problème majeur sur le plan social et médical : 1,5% de la population est affectée par des formes de retard mental de degré variable. Les retards mentaux peuvent être d'origine environnementale et/ou génétique. Les anomalies génétiques provoquant des retards mentaux sont des aberrations chromosomiques, des délétions subtélomèriques cryptiques et des mutations génétiques. 15% des différentes maladies héréditaires associées au retard mental, montrent une ségrégation liée au chromosome X (X-linked mental retardation, XLMR).
Quarante cinq gènes responsables de retards mentaux liés au chromosome X ont été clonés, parmi lesquels figure FMR1 (Fragile X Mental Retardation 1), situé en Xq27.3 et responsable du syndrome de l'X-Fragile.
Décrit par Lubs en 1969, le syndrome X-fragile se manifeste par une altération des fonctions cognitives supérieures, allant de simples difficultés d'apprentissage à un retard mental sévère. Le syndrome est souvent associé à une dysmorphie faciale et/ou ligamentaire, une dysplasie du tissu conjonctif et à une macroorchidie (hypertrophie des testicules) chez les individus de sexe masculin. Au niveau du cerveau des patients atteints du syndrome X fragile, on observe la présence d'épines dendritiques plus longues, plus fines et plus nombreuses que celles des individus sains.

Extraits

[...] C : SDS Page des élutions des billes de sépharose contenant la protéine FCT recombinante et standard de BSA. Pour les élutions 1 et 2 (E1 et nous observons une bande à 17kDa correspondant à la protéine FCT. 5µl de chaque élution on été déposés ainsi que 1 et 2µg de BSA La quantité de protéines recombinantes obtenue a été déterminée grâce à un standard BSA. Dans la figure 9 et nous avons rapporté le cas de la protéine recombinante FCT. [...]

[...] Fragile X Mental retardation Protein : many partners and multiple targets for a promiscuous function ? Current Genomics 515-522. Mazroui, R., Huot, M.E., Tremblay, S., Boilard, N., Labelle, Y., and Khandjian, E.W. (2003). Fragile X Mental Retardation protein determinants required for its association with polyribosomal mRNPs. Hum. Mol. Genet 3087-3096. Oberle, I., Rousseau, F., Heitz, D., Kretz, C., Devys, D., Hanauer, A., Boue, J., Bertheas, M.F., and Mandel, J.L. (1991). Instability of a 550-base pair DNA segment and abnormal methylation in fragile-X syndrome. [...]

[...] Or nous voyons, d'après nos résultats, que KH1 n'est pas important pour la liaison. De plus, le Docteur Mazroui a utilisé une technique de protéines délétées dans les différents domaines et nous ne savons pas si ces protéines sont correctement repliées comme la protéine FMRP pleine longueur. Nous avons préféré à la technique de mutation peu sûre, une technique de fabrication de protéines recombinantes qui ne contenaient chacune qu'un seul domaine d'intérêt. Ces domaines sont correctement repliés selon les études menées dans le laboratoire du Docteur Pastore (Adinolfi et al., 1999). [...]

[...] Le marquage obtenu avec E7 correspond bien aux microtubules du cytosquelette. L'anticorps est donc bien spécifique de la tubuline. De plus, les différentes concentrations représentées par D nous indiquent que la concentration 1 : 2000 est trop faible. Nous voyons que les marquages pour les concentrations 1 : 250 : 500 et 1 :1000 est identique. Nous avons donc la choisi la concentration d'anticorps la plus basse, c'est-à-dire celle de 1 : 1000. Les anticorps anti-actine JLA et IC3 (non montrés) nous ont donné des concentrations optimales respectivement de 1 : : 2000 et 1 : 1500. [...]

[...] Expert Rev. Mol. Med Davidovic, L., Tremblay, S., Gravel, M., De Koninck, P., and Khandjian, E.W. (2006). The fragile X syndrome: one protein missing and 1001 disoriented mRNAs. Med. Sci 41- Hagerman, R.J. (1996). Physical and behavioural phenotype. In Hagerman, R.J. and Cronister, A. [...]