Les techniques expérimentales: la phytooestrogène

Thèmes abordés

Techniques expérimentales, phytooestrogène, expérimentation, traitement, cancer

Résumé du document

Cancer du sein 20 à 30% de mortalité chez les femmes de plus de 50 ans (OMS, 2008).

De plus en plus fréquent.

Traitement lourd : tue plus de cellules saines, perte de cheveux, vomissement.

Recherche de nouveau traitement.

Extraits

[...] Phytoestrogène Techniques expérimentales Biomolécules et pathologies SOMMAIRE Introduction Définition Techniques expérimentales Résultats Conclusions INTRODUCTION Cancer du sein 20 à 30% de mortalité chez les femmes de plus de 50 ans (OMS, 2008) De plus en plus fréquent Traitement lourd : tue plus de cellules saines, perte de cheveux, vomissement. Recherche de nouveau traitement. [...]

[...] Deux types de cellules mammaires quatre tests Cellules non invasives Cellules invasives MTT Test Bleu Trypan INTRODUCTION Chambre de Boyden Test de blessure BUT : déterminer le nombre de cellule morte par les phytoestrogènes DEFINITIONS MDA-MD-231 Cellules invasives Cellules non invasives MCF-7 Cellules mammaire cancéreuses Épenchement pleural (culture in vitro) Possèdent des récepteurs aux oestrogènes Phytoestrogènes similaire aux oestrogènes Techniques expérimentales MTT 3-(4',5'-dimethylthiazol-2'-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide Dans les mitochondries des cellules viables : Dissolution au DMSO MTT 1h Cellule explosée Spectrophotométrie UV 490-630 nm Test Bleu Trypan Décolle les cellules Colore les cellules mortes Test Bleu Trypan Techniques expérimentales 100 μL trypsine 200 μL trypsine 200 μL Bleu trypan Techniques expérimentales Chambre de Boyden Matrigel : sécretion protéique de tumeur murine Consommation du matrigel, transvasement par chimiotactisme Milieu FBS Milieu 10% FBS FBS : Fetal Bovin Serum 3X PBS Fixer au méthanol Colorer noyau par hématoxyline Chambre de Boyden Techniques expérimentales Techniques expérimentales Test de Blessure Test de migration inférieur à 24h (temps de prolifération) LES RESULTATS Bleu Trypan MTT Test de blessure Chambre de boyden La concentration croissante de phytoestrogènes cause une augmentation de la mortalité des cellules cancéreuses Contrôle 20 µM 40 µM Contrôle 20 µM 40 µM MCF 7 Contrôle 20 µM 40 µM MDA Bleu trypan MTT La concentration croissante de phytooestrogènes cause une baisse de la viabilité des cellules cancéreuses MDA MCF 7 Test de blessure La concentration croissante de phytoestrogènes cause une baisse de la migration des cellules cancéreuses MCF 7 T 0h T 24h T 0h T 24h La concentration croissante de phytoestrogènes cause une baisse de la migration des cellules cancéreuses invasives Test de blessure La concentration croissante de phytoestrogènes cause une baisse de la viabilité des cellules cancéreuses 20 µM Contrôle 40 µM 40 µM 20 µM Contrôle Contrôle MDA MCF 7 Erreur expérimentale Chambre de Boyden Conclusions Les phytoestrogènes tue les cellules cancéreuses de façon sélective Ils sont moins efficaces Ils sont déconseillé dans l'alimentation infantile car perturbation endocrinienne observé chez le rat. [...]