Transfert de gènes : les applications médicales et thérapeutiques

Thèmes abordés

Transfert de gènes, applications médicales, applications thérapeutiques, clonage, expression des gènes, système hôte-vecteurs

Résumé du document

Le trasnfert de gènes sert à isoler et manipuler le matériel génétique, c'est:
- Une révolution dans le monde scientifique au XXe siècle
- Définitions des biotechnologies : application des méthodes et techniques utilisant les êtres vivants (parties ou produits) sous leur forme naturelle ou modifiée à des fins pratiques ou industrielles.
- Par exemple quand on fabrique du vin c'est une biotechnologie dite naturelle, les micros organismes savent s'échanger du matériel génétique naturellement. Nous allons parler des artificielles, fondées sur les manipulations de l'ADN in vitro.
- Manipulations de l'ADN in vitro : (transgènese)
On utilise ou modifie des gènes spécifiques et on les transfert dans des organismes ne les hébergeant pas.

Extraits

[...] Nous allons parler des artificielles, fondées sur les manipulations de l'ADN in vitro. Manipulations de l'ADN in vitro : (transgènese) On utilise ou modifie des gènes spécifiques et on les transfert dans des organismes ne les hébergeant pas. Clonage et expression des gènes 1. Clonage Production de clone(s) ( Obtenir un grand nombre de copies identiques : D'une cellule = clonage cellulaire D'un fragment d'ADN = clonage moléculaire Système de clonage hôte-vecteur 2. Expression du gène d'intérêt Par exemple expression du gène de l'insuline, on obtient une protéine recombinante c'est-à-dire fabriquée, par génie génétique. [...]

[...] Processus : extraction de l'ADN Copie des ARN en ADNc Intégration des ADNc dans des plasmides recombinants Intégration Tri des bactéries porteuses de l'ADNc recherché Cellules animales On ne parle pas de plasmide, car ne pénètrent pas, les vecteurs sont des virus (se multiplie qu'a l'intérieur d'une cellule). pas de plasmides dans les cellules eucaryotes. Animaux transgéniques L'hôte est un organisme vivant, on va fabriquer un animal transgénique en modifiant l'embryon via une greffe qui se multiplie dans tout l'organisme : l'animal va fabriquer abondamment certains molécules anormales. Applications au domaine de la santé 1. [...]

[...] Exemples de protéines recombinantes commercialisées à intérêt thérapeutique Insuline Non glycolysée, uniquement protéique donc pas besoin d'un système de cellule eucaryote trop développé, on peut faire appel à des bactéries qui sont incapables de glycolyser (mais osef du coup). Il y a des systèmes de production expression pour la chaine d'autres pour la chaine et on les associe ensuite via des ponts disulfure, et maintenant on peut le faire en une fois. On a su la fabriquer rapidement car demande importante de 200 millions de diabétiques. Hormone de croissance Quand on l'extrayait de l'hypophyse ça posait de grands problèmes. [...]

[...] Thérapie génique C'est la modification de gènes anormaux chez un patient, envisageable que pour des maladies génétiques causées par un seul gène défectueux (on isole le gène normal dans des cellules somatiques du tissu affecté) Prix Nobel en 1964 mais premiers succès dans les années 1990 pour le SCID (déficit immunitaire combiné sévère), un déficit en adénosine désaminase. Multiplication des cellules somatiques traitées (recombinées) : ex : cellules souches de la moelle osseuse (sg & SI) Principe : 1. Prélèvement de moelle osseuse (cellules déficientes) 2. Gène normal intégré dans un vecteur viral (tel que le rétrovirus) 3. [...]

[...] Moelle osseuse : production de l'enzyme ( guérison Thérapie génique : 2 voies In vivo : Injection directe. On apporte par inhalation le vecteur dans les cellules pulmonaire pour la mucoviscidose par exemple Ex vivo : Greffe de cellules génétiquement modifiées Problèmes posés par la thérapie génique (qui reste donc au niveau de l'essai clinique) Liés aux vecteurs Rétrovirus (ex : contre SCID) qui s'insèrent au hasard dans le chromosome (près d'un gène oncogène ( leucémie). Donc ils ont été quasi interdits, même si on arrive un peu mieux à cibler de nos jours. [...]