Transfert de gènes, applications médicales, applications pharmaceutiques, clônage, epression des gènes, système hôte-vecteurs
Le transfert de gènes c'est:
- Isoler et manipuler le matériel génétique
- Révolution dans le monde scientifique au XXe siècle
Définitions des biotechnologies : application des méthodes et techniques utilisant les êtres vivants (parties ou produits) sous leur forme naturelle ou modifiée à des fins pratiques ou industrielles.
Par exemple quand on fabrique du vin c'est une biotechnologie dite naturelle, les micro organismes savent s'échanger du matériel génétique naturellement. Nous allons parler des artificielles, fondées sur les manipulations de l'ADN in vitro.
Manipulations de l'ADN in vitro :
On utilise ou modifie des gènes spécifiques et on les transfert dans des organismes ne les hébergeant pas.
[...] Thérapie génique C'est la modification de gène anormaux chez un patient, envisageable que pour des maladies causées par un seul gène défectueux (on isole le gène normal dans des cellules somatiques du tissu affecté) Prix Nobel en 1964 mais premiers succès dans les années 1990 pour le SCID (déficit immunitaire combiné sévère), un déficit en adénosine désaminase . Principe : 1. Prélèvement de moelle osseuse (cellules déficientes) 2. Gène normal intégré dans un vecteur viral (tel que le rétrovirus) 3. Insertion du gène dans le chromosome cellulaire 4. Réinjection des cellules modifiées (+gène normal) au patient 5. [...]
[...] Applications au domaine de la santé 1. Les produits pharmaceutiques Application commerciale du génie génétique via l'introduction dans les cellules de gènes pour fabriquer des molécules utilisées en thérapeutique. Système d'expression : bactéries, levures, cultures cellules animales Fabrication de protéines importantes dans les traitements médicaux Cultures massives (fermenteurs) : gènes recombinants ( production Si sécrétions ( purification simplifiée Lorsqu'on fabrique une protéine, elle est stockée soit dans le cytoplasme soit dans l'espace périplasmique donc il faut détruire la cellule pour récupérer la protéine souhaitée (remodifier génétiquement . [...]
[...] Moelle osseuse : production de l'enzyme ( guérison Thérapie génique : 2 voies In vivo : Injection directe. On apporte par inhalation le vecteur dans les cellules pulmonaire pour la mucoviscidose par exemple Ex vivo : Greffe de cellules génétiquement modifiées Problèmes posés par la thérapie génique (qui reste donc au niveau de l'essai clinique) Liés aux vecteurs Rétrovirus (ex : contre SCID) qui s'insèrent au hasard dans le chromosome (près d'un gène oncogène ( leucémie). Donc ils ont été quasi interdits, même si on arrive un peu mieux à cibler de nos jours. [...]
[...] Nous allons parler des artificielles, fondées sur les manipulations de l'ADN in vitro. Manipulations de l'ADN in vitro : On utilise ou modifie des gènes spécifiques et on les transfert dans des organismes ne les hébergeant pas. Clonage et expression des gènes 1. Clonage Production de clone(s) ( Obtenir un grand nombre de copies identiques : D'une cellule = clonage cellulaire D'un fragment cellulaire = clonage moléculaire Système de clonage hôte-vecteur 2. Expression du gène d'intérêt Par exemple expression du gène de l'insuline, on obtient une protéine recombinante c'est-à-dire fabriquée, par génie génétique. [...]
[...] Il y a des systèmes de production expression pour la chaine d'autres pour la chaine et on les associe ensuite via des ponts disulfure, et maintenant on peut le faire en une fois. On a su la fabriquer rapidement car demande importante de 200 millions de diabétiques. Hormone de croissance Quand on l'extrayait de l'hypophyse ça posait de grands problèmes. Elle n'est pas non plus glycolysée donc peut-être fabriquée via des bactéries aussi. Si défaut de cette hormone, retard de croissance, nanisme . [...]
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