CCM chromatographie sur couche mince, chromatographie sur colonne, dilution, spectre d'absorption, colorant, concentration, éthanol, spectrophotométrie, absorbance, longueur d'onde, coefficient d'extinction molaire, loi de Beer-Lambert, courbe d'étalonnage
Ce document est le compte-rendu d'un TP sur la séparation des colorants du sirop de menthe en utilisant la chromatographie sur couche mince.
[...] Elle est souvent utilisée pour la purification de composés, la séparation de mélanges complexes et la préparation d'échantillons pour des analyses plus poussées. Avantages La chromatographie sur couche mince est rapide, simple et économique. Elle est adaptée à des applications où une séparation rapide et préliminaire des composés est nécessaire. La chromatographie sur colonne offre une meilleure résolution pour les mélanges complexes, une plus grande capacité de charge d'échantillons, et est souvent plus facile à automatiser pour des applications à plus grande échelle. [...]
[...] On analyse ensuite les spectres qu'on obtient des solutions bleu et jaune obtenus en sortie de colonne avec le spectre du sirop de menthe. Spectre d'absorption du sirop de menthe dilué 10 x Spectre d'absorption du colorant jaune obtenue en sortie de colonne Spectre d'absorption du colorant bleu obtenu en sortie de colonne Le colorant bleu présent dans le sirop de menthe est caractérisé par un maximum d'absorption à la longueur d'onde de 628 nm, comme le bleu de patenté. [...]
[...] x x coefficient d'extinction molaire ɛ. On sait que L C et que l'équation de la droite est de Ici, x=C en g/L et donc cependant on sait que L=largeur de la cuve= 1 cm, on peut donc dire que a=ɛ. x En remplaçant, on a alors 146 L⋅g−1⋅cm−1 Gamme étalon pour le bleu de patenté : Tube Concentratio n Vtotale en mL V eau en mL V bleu de patenté en mL Solution de bleu de patenté à 1x10[−2]g/L: On règle cette fois-ci le spectrophotomètre à la longueur d'onde 628 nm On fait le réglage du zéro On mesure l'absorbance des solutions : Tube Absorbance à 628 nm On trace ensuite le graphique de l'absorbance en fonction de la concentration en bleu de patenté : Détermination du coefficient d'extinction molaire : En procédant de la même façon que précédemment on a ɛ=1258 L⋅g−1⋅cm−1 Q9. [...]
[...] Séparation des colorants du sirop de menthe Q1. Principe de la chromatographie sur couche mince : La chromatographie sur couche mince (CCM) repose sur la différence d'affinité des composés chimiques entre une phase mobile (liquide) et une phase stationnaire (couche mince). Q2. Analyse et interprétation des résultats de CCM : Afin de séparer les colorants du sirop de menthe, il va falloir un premier éluant qui n'entraîne que l'un des colorants puis un second qui entraînera le second colorant Ici, on testera 3 éluants : l'éthanol, l'eau et l'eau salée. [...]
[...] Détermination de la concentration des colorants dans le sirop de menthe Mesure des absorbances des deux solutions sorties de la colonne à . [...]
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