Downstream, azote, méthode de Kjeldahl, minéralisation, acide sulfurique, urée, méthode du biuret, agrosciences, SIIBIOC Sciences de l'Ingénieur Industriel BIOChimie
But : doser l'azote contenu dans le sérum par la méthode Kjeldahl.
La méthode de Kjeldahl permet de déterminer le taux d'azote contenu dans un échantillon. C'est une méthode très souvent utilisée dans l'analyse de l'alimentation humaine, animale, l'analyse des sols et des eaux. Ici, elle est utilisée pour calculer la concentration de protéines dans le sérum sanguin. Les sources d'azote dans le sérum sont les protéines plasmatiques, les acides aminés, peptides, urée, acide urique ... La proportion d'azote total provient à 98-99 % des protéines et à 1-2 % de composés non protéiques. Les protéines stériques contiennent environ 16 % d'azote.
[...] = 54,40 Cette masse d'azote est contenu dans une prise d'essai initiale de 5 mL. La concentration d'azote dans le sérum est de 10,88 mg/mL Résultat pour l'urée Pour cet essai, on peut comparer la masse d'azote obtenu par dosage (49,51 mg) avec la masse d'urée pesée (0,1116 g). La masse d'azote contenu dans la masse d'urée pesée est de : = .46,65 = 52,21 La masse d'azote dosé par Kjeldahl est légèrement inférieur à la masse d'azote introduit dans le ballon. [...]
[...] Rapport Downstream : Dosage de l'azote par Kjeldahl MASTER 1 Sciences de l'Ingénieur Industriel Biochimie (SIBIOC) Département Agro biosciences et Chimie - Ath But Doser l'azote contenu dans le sérum par la méthode Kjeldahl. I. Principe de la méthode de Kjeldahl La méthode de Kjeldahl permet de déterminer le taux d'azote contenu dans un échantillon. C'est une méthode très souvent utilisé dans l'analyse de l'alimentation humaine, animale, l'analyse des sols et des eaux. Ici, elle est utilisée pour calculer la concentration de protéines dans le sérum sanguin. [...]
[...] Par biuret, on obtient une concentration en protéines dans le sérum de 51,98 mg/mL. Il y a une nette différence entre les deux méthodes. Cependant, la méthode Kjeldahl semble donner un résultat plus proche du résultat réel car, dans la manip la concentration en albumine et en globuline semble être sous-estimé. La concentration en protéines est donc elle aussi sous-évalué. Même s'il y a une erreur sur la méthode Kjeldahl qui n'est pas négligeable ( sur le standard), on peut approcher la concentration réelle en protéines via l'erreur relative sur le standard. [...]
[...] Préparation Solution de NaOH 30 % Cette solution permet de neutraliser l'acide sulfurique concentré mis dans le ballon Kjeldahl. Il faut déterminer le volume de NaOH nécessaire pour neutraliser 6 mL d'H2SO mol/L. La concentration molaire de NaOH est de : Réaction de neutralisation : = = 0,108 = = 0,216 Il faut donc 28,8 mL de NaOH pour neutraliser l'acide sulfurique dans le ballon. On introduit un volume un peu supérieur pour être sûr de neutraliser tout l'acide sulfurique. [...]
[...] Solution Véq nazote (mol) mazote Cazote (mg/mL) Blanc 40,8 0,000076 1,06 0,21 Urée 23,6 0,003610 49,51 9,90 Sérum 21,9 0,003960 54,40 10,88 Détail de calcul pour le sérum : Lors du titrage de l'excès d'acide sulfurique par NaOH, on obtient un volume à l'équivalence de 21,9 mL. = = 4,500. 10?3 = = 2,225 .10?3 La quantité de H2SO4 introduit dans l'erlenmeyer était de : = = 4,23. 10?3 Le nombre de moles d'acide sulfurique ayant réagi avec l'azote est de : = 4,23. 10?3 ? 2,250. 10?3 = 1,98. [...]
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