Le dosage de la caféine à l’aide de la chromatographie HPLC

Thèmes abordés

Pharmacie - Santé - Social, Dosage de caféine, chromatographie HPLC, travail pratique, extraction de caféine, feuilles de thé, spectre infrarouge, courbe d'étalonnage, bicarbonate de calcium, dichlorométhane

Résumé du document

Lors de ce travail pratique, nous allons extraire la caféine du thé puis réaliser son spectre infrarouge et mesurer son point de fusion. Nous allons ensuite réaliser un dosage sur différents "Coca-Cola" commerciaux afin de comparer avec les informations sur l'étiquette. Afin de réaliser ce dosage, nous allons construire une courbe d'étalonnage à partir de solution de caféine de concentration connue. En premier lieu, nous avons réalisé l'extraction de la caféine du thé. Pour réaliser cette extraction, nous introduisons 20g de thé et 20g de bicarbonate de calcium dans 250 ml d'eau distillée dans un ballon rodé. Le bicarbonate de calcium permet de neutraliser l'acidité. En effet dans les feuilles de thé, il y a des acides de tanins solubles dans l'eau. Le carbonate permet d'éliminer l'acide. La caféine n'est donc plus soluble dans l'eau. L'extraction au dichlorométhane dans lequel la caféine à une solubilité modérée permet la séparation de la caféine des impuretés solubles.

Extraits

[...] La fiole à vide est refroidie dans la glace puis on ajoute 80mL de dichlorométhane au filtrat. On agite doucement durant 10min (il faut faire attention à une possible émulsion entre les deux phases si l'agitation est trop violente). Par la suite on décante le mélange en laissant reposer l'ampoule à décanter 10 min. On recueille la phase organique qui est en dessous puis on sèche sur sulfate de magnésium. Enfin on évapore le solvant sous vide à l'évaporateur rotatif. [...]

[...] Dosage de la caféine à l'aide de la chromatographie HPLC Lors de ce TP, nous allons extraire la caféine du thé, puis réaliser son spectre infrarouge et mesurer son point de fusion. Nous allons ensuite réaliser un dosage sur différents cocacola commerciaux afin de comparer avec les informations sur l'étiquette. Afin de réaliser ce dosage, nous allons construire une courbe d'étalonnage à partir de solution de caféine de concentration connue. Extraction de la caféine du thé En premier lieu nous avons réalisé l'extraction de la caféine du thé. [...]

[...] De plus il se peut qu'il y ait quelques impuretés ce qui expliquerait certains pics supplémentaires sur le spectres IR, par rapport aux pic attendus au vu de la structure de la molécule de caféine. Par ailleurs, la droite d'étalonnage n'est pas linéaire car il y a des incertitudes systématiques et statistiques que l'on prend en compte. De ce fait, on obtient des concentrations approximatives de colas. On constate des différences significatives par rapport aux concentrations indiquées sur les étiquettes commerciales. Au travers de ce TP nous avons notamment appris à utiliser la chromatographie HPLC. [...]

[...] Tableau récapitulatif du dosage des différents colas Pour le cola 12, les résultats sont cohérents avec ceux indiqués par le fabriquant. Pour le cola 11, on observe une différence de 10mg/100mL, on peut expliquer cette différence par la composition complexe du cola. Cette concentration peut regrouper des composés autres que la caféine. (Dosage réaliser 2 fois et filtrage également) Pour le cola 6 (redbull), on trouve une concentration 9mg/100mL plus faible. Le cola étant ancien, il y a peut-être eu une dégradation de la caféine. [...]