La chromatographie liquide haute performance (HPLC) : L’échantillon

Thèmes abordés

Chromatographie liquide haute performance, HPLC, échantillon, lingette démaquillante, parabènes, PHB de méthyl, éthyl, propyl, isobutyl, butyl

Résumé du document

Nous allons étudier la spécificité dans l'analyse de parabènes dans une lingette démaquillante. Le but est de montrer que l'on identifie sans ambiguïté les produits utilisés.

La spécificité est définie par la relation existant entre la propriété mesurée par la méthode et la grandeur à mesurer. Une méthode est spécifique lorsqu'elle permet de mesurer un composé avec la garantie que le signal instrumental ne provient que du composé.
La méthode des ajouts dosés, entre autres, qui consiste à ajouter une quantité connue de l'élément à doser dans l'échantillon puis à le doser, permet de tester la spécificité d'une méthode.

Il existe 6 parabènes différents. Les lingettes que nous analysons contiennent les PHB de méthyl, éthyl, propyl, isobutyl et butyl.
Nous réalisons la mise au point d'un test spécifique pour les 6 parabènes, incluant aussi dans notre mise au point le PHB-Benzyl comme étalon interne, pour vérifier s'il y a des problèmes d'interférences, et nous anticipons une éventuelle erreur dûe à la préparation de la lingette.

Extraits

[...] • Hauteur PO42- : elle est environ égale à 1/5 de la hauteur des chlorures. La concentration en phosphates sera donc de 10 ppm. Pour le point bas, on peut descendre jusqu'à une hauteur supérieure à 10 fois le bruit de fond. On prendra pour les chlorures une concentration 1à fois plus petite que 0,5 ppm. Donc dans le point bas, on cherchera à avoir des concentrations de : • 0,05 ppm de chlorures • 0,10 ppm de nitrites • 0,15 ppm de nitrates • 0,25 ppm de phosphates • 0,15 ppm de sulfates. [...]

[...] Nous avons toujours le même petit épaulement des PHB butyl et isobutyl. Donc le solvant de travail choisi sera un mélange eau – méthanol 45% - 55% Nous garderons le débit à 1ml/min. Conditions chromatographiques Détecteur : λ = 254 nm Solvant : 45% eau – 55% méthanol Débit : 1 mL/min Pression : 2500 psi Etude d'encadrement des solutions à analyser Encadrement Après injection de la solution lingette diluée au 1/2000e, de la solution Nisapulvol Ref dilué au 1/50e et de la solution 6 parabènes à 6 mg/L, nous pouvons estimer les bornes de la gamme d'étalonnage. [...]

[...] Le but est de montrer que l'on identifie sans ambiguïté les produits utilisés. Principe : La spécificité est définie par la relation existant entre la propriété mesurée par la méthode et la grandeur à mesurer. Une méthode est spécifique lorsqu'elle permet de mesurer un composé avec la garantie que le signal instrumental ne provient que du composé. La méthode des ajouts dosés, entre autres, qui consiste à ajouter une quantité connue de l'élément à doser dans l'échantillon puis à le doser, permet de tester la spécificité d'une méthode. [...]

[...] Pour les ions Nitrates : n (ppm) (µS/cm*sec) On obtient une droite étalon avec un coefficient de corrélation de 0,9999. Pour les ions Phosphates : n (ppm) (µS/cm*sec) Le coefficient de corrélation de la droite d'étalonnage de l'ion phosphate est de 0,9998. Pour les ions Sulfates : n (ppm) (µS/cm*sec) Pour l'ion sulfates, on obtient un point aberrant à une concentration de 1,20ppm car on voit que le point est très éloigné de la droite. Ce point ne sera donc pas pris en compte pour la suite des analyses. [...]

[...] On peut identifier les ions présents dans l'eau inconnue et les quantifier. D'après le chromatogramme 18 : Inconnu, on peut dire que l'eau contient 5 ions dont un restant inconnu et le premier pic après le pic provient d'une contamination. Grâce au temps de rétention de la gamme d'étalonnage, on retrouve l'ion chlorure, l'ion nitrate, l'ion phosphate et enfin l'ion sulfate et le pic portant le numéro 2 on ne sait pas à quoi il correspond, car il n'était pas présent dans la gamme d'étalonnage. [...]