Travaux pratiques de biochimie clinique

Thèmes abordés

Dosage colorimétrique, Université Mohammed-V de Rabat, biochimie, médecine, biochimie clinique, LCR Liquide CéphaloRachidien, Enzymologie, bilirubine, HDL Hight Density Lipoproteins, cholestérol, dosage du cholestérol, glucide, triglycérides, corps cétoniques, biochimie analytique, biochimie physiopathologique, biologie moléculaire

Résumé du document

La biochimie clinique est l'étude des processus biochimiques à la base de la vie de l'homme sain ou malade et l'application des méthodes chimiques employées au laboratoire pour le diagnostic, le contrôle du traitement et la prévention des maladies.
Cette science comporte donc deux aspects :
- Un aspect technique : « biochimie analytique »
- Un aspect clinique, interprétation des résultats : « biochimie physiopathologique »
- L'interprétation des résultats des données biochimiques statiques ou dynamiques exigent la connaissance de la qualité des techniques et la recherche constante de tests mieux adaptés à la découverte de nombreuses conséquences de la maladie.
Cependant, certains aspects physiopathologiques n'ont pu être expliqués qu'après la survenue de la biologie moléculaire. En effet, la biologie moléculaire a permis des découvertes essentielles non seulement en biochimie génétique, mais également dans tous les autres domaines de la biologie : la biologie moléculaire consiste à étudier la structure des gènes, leur expression et le contrôle de leur expression. Le génie génétique représente l'application des connaissances de la biologie moléculaire.

Extraits

[...] La coloration reste stable pendant 1 heure. IV- Résultats Déterminer la concentration de votre sérum en protéines d'après la formule suivante : Taux protéines sériques = Abs (Dosage) x concentration de l'étalon Abs (Etalon) 1 -valeurs normales Chez le nouveau-né, la valeur oscille entre 46 et 70 g Chez l enfant les valeurs sont de 56 – 75 g / L ans – 2 ans ) Chez l'adulte ( 60 ans) est de 64 à 83 g/l. Variations pathologiques L'hypo protéinémie est due aux affections suivantes : - Syndromes néphrotiques (protéinurie importante). [...]

[...] - La glycorachie peut être normale au cours de certains syndromes neurologiques. II Résultats LCR Normal : Aspect clair 0,15- 0,4 g/L LCR Pathologique : Aspect : trouble pathologie méningites hyperprotéinorachie hypoglycorachie chlorurachie MANIPULATION III ENZYMOLOGIE LE DOSAGE DES TRANSAMINASES. LE DOSAGE DES PHOSPHATASES ALCALINES LES BILIRUBINES T R A N S A M I N A S ES Les transaminases sont des enzymes assurant les réactions de transfert du groupement aminé d'un acide aminé sur un acide cétonique avec formation d'un nouvel acide aminé et d'un nouvel acide cétonique. [...]

[...] Il est nécessaire de tracer une gamme d'étalonnage avec une gamme de témoins dans les conditions ou la loi de Beer Lambert est vérifiée. Cette gamme doit couvrir les valeurs physiologiques et pathologiques et permettre leur détermination précise. Conditions à respecter lors d'un dosage utilisant une méthode colorimétrique - La gamme d'étalonnage et les dosages doivent toujours être réalisés simultanément afin que tous les tubes se trouvent dans les mêmes conditions (de température, de durée d'incubation - Le volume final de liquide est identique dans chacun des tubes. [...]

[...] Déduire la concentration de la bilirubine indirecte. IV- Résultats Valeurs normales Le sérum normal contient de 2 à 10 mg/l de bilirubine totale, de 0 à 4 mg/l de bilirubine conjuguée et de 2 à 6 mg/l de bilirubine non conjuguée. Variations pathologiques Hyperbilirubinémie à bilirubine indirecte Celle-ci correspond en général aux syndromes d'hémolyses . Dans les ictères hémolytiques, la bilirubine environne 50 mg/l, dont indirecte. Incompatibilité foeto-maternelle : Anémies de Bierner . Hépatites virales Hyperbilirubinémie à bilirubine directe Dans les ictères par obstruction, on constate une bilirubinémie de 250 mg/l, presque totalement directe. [...]

[...] Cette lecture permet de calculer la concentration de la bilirubine directe. Ajouter ensuite dans le même tube 2,5 ml de méthanol. Bien agiter, laisser reposer 30 min à la température du laboratoire, ensuite faire une deuxième lecture à la même longueur d'onde (535 nm). Cette dernière lecture permet d'exprimer la concentration de la bilirubine totale Le blanc est préparé en utilisant un sérum non ictérique et en ajoutant 0,5 ml d'HCl et 0,5 ml de diazo-réactif. Calculer les concentrations de la bilirubine directe et de la bilirubine totale en vous référant à la courbe d'étalonnage. [...]