Rapport Downstream - Dosage du glycogène dans le foie

Thèmes abordés

SIBIOC Sciences de l'Ingénieur Industriel Biochimie, agrobiosciences, chimie, foie, glycogène, Downstream process, molécule, glucose, masse molaire, droite d'étalonnage, spectrophotométrie

Résumé du document

Le document est un exercice corrigé sur le dosage du glycogène dans le foie par spectrophotométrie.

Extraits

[...] = = 353,63 On souhaite déterminer la concentration en glycogène dans cette solution. Le glucose (C6H12O6) et les unités constitutives du glycogène (C6H10O5) ont des structures légèrement différentes. Il faut donc déterminer un facteur de conversion. La concentration en glycogène est obtenue en multipliant la concentration en glucose par le facteur de conversion. On détermine la quantité de glycogène contenue dans 100 mg de foie. La solution C a un volume de 50 mL et la masse de foie pesée est de 132,1 mg. [...]

[...] Solution d'hydroxyde de potassium Afin de réaliser l'extraction du glycogène, il faut utiliser une solution alcaline. On utilise donc de l'hydroxyde de potassium Le volume à préparer est de 10 mL. = = 3 ? On pèse 3 g de KOH que l'on dissout dans 10 mL d'eau distillée. Résultats et interprétations Droite d'étalonnage À partir de différentes dilutions de la solution on trace la droite d'étalonnage par mesures des absorbances du produit de la réaction entre l'anthrone et les hexoses (glucose) à 620 nm. [...]

[...] Pour obtenir la solution de glucose 50 ?g/mL. On pèse environ exactement 100 mg d'amidon que l'on dissout avec de l'eau distillée dans un ballon jaugé de 20 mL (solution A). La solution A a une concentration d'environ exactement 50 mg/mL. La masse pesée est de 101,1 mg. À partir de cette solution on prélève 1 mL que l'on introduit dans un ballon jaugé de 100 mL. La mise au trait s'effectue avec de l'eau distillée (solution B). La solution B a une concentration d'environ exactement 50 ?g/mL. [...]

[...] A partir des solutions on effectue les dilutions suivantes afin de déterminer la concentration en glucose, puis en glycogène : Tube n° V solution C V eau V anthrone Fd 1 3 6 2 0,2 2,8 15 3 0,3 2,7 10 4 0,5 2,5 6 5 1 2 3 Le tableau suivant reprend les mesures d'absorbance à 620 nm pour les 2 séries ainsi que les résultats calculés à partir de ces valeurs : Tube n° Absorbance Cglucose dilution (µg/mL) Cglucose C (µg/mL) Cglycogène C (µg/mL) mglycogène (µg) pour 100 mg foie Série 1 1 2 0,2465 23,58 353,63 318,26 12046,27 3 0,4476 40,33 403,33 363,00 13739,59 4 0,551 48,95 293,70 264,33 10004,92 5 0,8539 74,19 222,58 200,32 7582,04 Série 2 1 2 0,1374 14,48 217,25 195,53 7252,41 3 0,1816 18,17 181,67 163,50 6064,54 4 0,293 27,45 164,70 148,23 5498,15 5 0,6498 57,18 171,55 154,40 5726,82 Les concentrations en glucose obtenues pour les tubes n°5 de chaque série sont à rejeter car les valeurs se trouvent en dehors de la droite d'étalonnage établie µg/mL à 50,50 µg/mL). Le calcul des moyennes, écart-type, ? s'effectuera sur les tubes n°2, n°3 et n°4 (aucune valeur aberrante par Q test). Détail calcul pour l'essai n°2 (série : En utilisant la droite d'étalonnage établit, on détermine la concentration en glucose du tube n°2. Le facteur de dilution est de 15 on obtient alors la concentration en glucose dans la solution C. [...]

[...] Dans la littérature, on trouve des valeurs de 6 à en masse de glycogène dans le foie (6000 à µg). La valeur trouvée pour la deuxième série est dans cet intervalle, tandis que celle de la première série se trouve légèrement en dehors. Il est difficile de dire dans quelle série a eu lieu l'erreur de manipulation (ayant eu des résultats proches des deux bornes théoriques). Les intervalles de confiance sont très grands, les mesures effectuées étaient donc assez dispersées autour de la moyenne. [...]