Analyses bactériologiques - Détermination des indicateurs de la pollution fécale

Thèmes abordés

Analyses bactériologiques, pollution fécale, spores, milieu Litsky, méthode de filtration, méthode de dilution, bactériologie, milieu Rothe

Résumé du document

La contamination microbiologique d'origine fécale de l'eau est un problème qui a un impact majeur sur la qualité de l'eau.
L'objectif de ce TP est de savoir les méthodes de la détermination des indicateurs et les sources de la pollution fécale.
Les méthodes qu'on a faites dans ce TP sont : la méthode de filtration et la méthode de dilution NPP à 3 tubes.

Extraits

[...] L'objectif de ce TP est de savoir les méthodes de la détermination des indicateurs et les sources de la pollution fécale. Les méthodes qu'on a faites dans ce TP sont : la méthode de filtration et la méthode de dilution NPP à 3 tubes. Méthode de filtration sur membrane La filtration sur membrane est une technique de numération adaptée pour dénombrer les bactéries présentes à des concentrations très faibles dans l'eau. Pour pouvoir dénombrer ces bactéries, il est alors nécessaire d'analyser des volumes d'eau importants. [...]

[...] D'après table de Mac Grady n=20 Nombre de bactéries = 20/10-3 =20.103 UFC/1ml= 2.106 UFC/100ml Résultat de coliformes fécaux Nombre de bactéries = 2,3.10[6] UFC/100ml Origine de la pollution fécale : CF/SF = 2,3.10[6]/2.106 = 1.15 Donc la pollution fécale est d'origine incertaine Recherche de spores de clostridium sulfito-réducteur On prend les tubes de dilution, après on fait chauffer ces dilutions 10 minutes à 80°C. Ensuite on fait ensemencer 5ml de chaque dilution dans un tube contenant le milieu viande foie. [...]

[...] ❖ Matériel Les tubes à essai Pipette de 1ml Pipette graduée Vortex Anse ❖ Expérience Dilution On prend 9 tubes à essai et on met dans chaque tube 9ml de l'eau distillée à l'aide d'une pipette stérile, après on prélève 1ml de l'échantillon à analyser (l'eau usée) que l'on place dans un des tubes contenant les 9ml de l'eau distillée et on homogénéise la solution à l'aide du vortex, puis on prélève 1ml de ce tube pour le mettre dans un autre tube et ainsi de suite jusqu'au neuvième tube. Test présomptifs : milieu Rothe (streptocoques fécaux) On prend 3 tubes contenant milieu Rothe. On prélève 1ml de chacune des dilutions que l'on introduit dans chaque tube. On met les tubes à incuber à 37°C pendant 24h à 48h. [...]

[...] Deux boites contiennent un milieu Tergitol (verre) pour déterminer les coliformes fécaux et totaux. Pince Bec Bunsen L'échantillon à analyser : L'eau du robinet Les boîtes pétries et les membranes ❖ Expérience On met la membrane sur le support de filtre à l'aide d'une pince, ensuite on ajoute 20ml de l'eau de robinet dans le récipient supérieur, et il faut démarrer la pompe pour filtrer l'eau. Après filtration on met la membrane doucement (pour éviter les bulles d'air) sur la boite qui contient Slanetz. [...]