Technique d’analyse moléculaire du cancer

Résumé du document

Ces dernières 20 années, les avancées technologiques dans la biologie moléculaire ont permis de comprendre la pathogénie de cancer humain.
L'application de technologie moléculaire à l'étude du cancer a mené non seulement à des débouchés dans le diagnostic de tumeur, mais a fourni aussi des bases pour l'évaluation de progression de la maladie.

L'analyse de l'expression du gène représente un secteur clé de recherche dans l'étude de cancer humain et un grand nombre de chapitres dans l'Analyse Moléculaire de Cancer traitent de ce sujet.

La technologie globale de microarray d'utilisation d'analyse d'expression d'ARN permet l'identification de gènes qui sont différentiellement exprimés dans la tumeur contre les tissus normaux; ceci est une approche puissante pour identifier les gènes qui sont centraux au développement de la maladie ou à la progression.

Extraits

[...] L'analyse du sang ne pose aucun problème les cellules étant déjà en suspension. Par contre les tissus cellulaires doivent être dissociés et les agrégats éliminés afin de pouvoir être analysés. LE CENTRAGE HYDRODYNAMIQUE Dia11-rarescell.jpg Le cytomètre mémorise TOUS les paramètres de CHAQUE cellule considérée INDIVIDUELLEMENT dans une LISTE INFORMATIQUE Une cellule différente de 10.000 à 30.000 autres cellules peut être retrouvée dans cette liste et analysée Dans ce graphique, chaque point représente UNE cellule: Sur 100.000 cellules cellules différentes sont repérées. [...]

[...] introduction La DGGE (Denaturing gradient gel electrophoresis) est une technique d'électrophorèse permettant la séparation de molécules d'acides nucléiques (ADN ou ARN) de même taille. Son principe consiste à déposer un échantillon d'ADN (ou d'ARN) sur un gel d'électrophorèse contenant un agent dénaturant (par exemple l'urée). Les gels dénaturants induisent une fusion de l'ADN à différents stades. L'ADN simple brin résultant arrête de migrer et forme des bandes séparées L'électrophorèse dénaturante de gel de pente (DGGE) a été introduite il y a 20 ans comme un système de gel pour séparer les fragments d'ADN. [...]

[...] Vérifier le niveau tampon dans l'aquarium et si nécessaire compléter le niveau avec le demi.). Commencer la circulation (60°) à préchauffage (prises approximativement 20 min) Les échantillons le plus facilement sont introduits à la pipette dans les fentes quand le gel se tient au mettre hors jeu C'est souvent difficile à voir que les entailles et ayant les plaques de verre Avant de Charger les Echantillons Si on veut plus de stabilité on utilise la position de moulage Enlever le peigne du gel et rincer les fentes avec tampon à l'aide d'une seringue Remplir la fente du support. [...]

[...] Avidine: protéine du blanc d'oeuf se liant spécifiquement et avec une grande affinité à la biotine Banque de gènes: collections de clones cellulaires (bactéries, levures . ) où chaque cellule renferme un exemplaire différent de DNA recombiné à un vecteur Biotine: molécule utilisée comme marqueur dans certains systèmes de sondes non radioactives en raison de sa très grande affinité pour l'avidine COT-1 DNA humain: est obtenu à partir de DNA placentaire humain par extraction, cisaillement, dénaturation et réassociation du DNA sous certaines conditions qui l'enrichissent en séquences de DNA répétitives comme les familles Alu I et Kpn I. [...]

[...] LEXIQUE Sources : les définitions suivantes sont tirées de - Atlas de poche de génétique, E. Passarge. - Biologie moléculaire, J.-C. Kaplan, M. Delpech. - Memento de biologie moléculaire, Prof. [...]