LES TECHNIQUES HISTOCHIMIQUES ET OU CYTOCHIMIQUES

Résumé du document

LES TECHNIQUES HISTOCHIMIQUES ETOU CYTOCHIMIQUES
Objectif : Utilisation de réactions chimiques permettant de mettre en évidence des molécules particulières dans la cellule

Extraits

[...] Uridine radioactive : L'incorporation de l'uridine radioactive permet de détecter et de localiser l'ARN en synthèse. Mannose ou fructose radioactifs: L'incorporation du fructose radioactif permet de détecter et de localiser les molécules glycosylées (glycoprotéines ou glycolipides). Méthodes spécifiques Ces méthodes permettent de détecter la présence d'une molécule particulière. Il existe 3 méthodes Immunohistochimie (IHC) Hybridation In situ (HIS) Histoenzymologie Immunohistochimie (IHC) L'immunohistochimie (ou l'immunocytochimie) a pour but de localiser dans les tissus ou les cellules une protéine donnée grâce à la liaison d'un anticorps dirigé spécifiquement contre la protéine (antigène). [...]

[...] LES TECHNIQUES HISTOCHIMIQUES ET/OU CYTOCHIMIQUES Objectif : Utilisation de réactions chimiques permettant de mettre en évidence des molécules particulières dans la cellule 2 types de méthodes existent Méthodes non spécifiques Méthodes spécifiques Méthodes non spécifiques Ces méthodes permettent de détecter un ensemble de molécules ayant une propriété chimique commune : exemple : présence de sucres, protéines, lipides etc. Méthode Acide Periodique-Schiff (APS) Intestin grêle: coloration APS Détection et localisation des polysaccharides Son principe : L'identification du glycogène est réalisée grâce à la réaction à l'acide périodique de Schiff (PAS) qui correspond à l'oxydation de certains polysaccharides par l'acide périodique. [...]

[...] Les sites de liaison (épitopes) de cet anticorps (dit anticorps primaire) sont ensuite révélés par un second anticorps marqué par un fluorochrome). Fluorochrome antigène porté par la surface des cellules cancéreuses Lame en verre Cellule humaine cancéreuse qui porte des antigènes A Anticorps secondaire obtenu en immunisant un autre animal contre les anticorps de l'animal L'anticorps secondaire est couplé par une molécule fluorescente (fluorochrome) Anticorps primaire contre la protéine A obtenu en immunisant un animal Observation au microscope optique (observation de la fluorescence jaune) Hybridation in situ (HIS) Technique qui permet de localiser une séquence de nucléotide connue mono-brun (ADN ou ARN) dans un tissu biologique (selon l'affinité entre les bases azotées complémentaires de l'ADN ou de l'ARN). [...]