Le noyau - publié le 08/04/2013

Thèmes abordés

Noyau, cellules eucaryotes, chromosome, matériel héréditaire, chromatine

Résumé du document

Le noyau :
- dans les cellules eucaryotes,
- en général unique, sphérique et central (mais…,)
- renferme la quasi-totalité du matériel héréditaire (au niveau de la chromatine),
- délimité par « l'enveloppe nucléaire » pendant l'interphase,
- aspect morphologique très variable :
o noyau pendant interphase,
o chromosomes lors de la mitose.

Extraits

[...] Hybridation génomique comparative (CGH) sur métaphases iv. CGH sur puces à ADN (CGH array) v. Quantification gènes (Q-PCR) / transcrits (Q-RT PCR) = fondée sur PCR - FISH chromosome spécifique : 12 à 24h après le prélèvement on peut dire si trisomie ou monosomie ou normal ( compter le nombre de chromosome pour certain chromosome seulement. - FISH peinture chromosomique = caractériser remaniements (translocations+++, échange chromosome) - FISH locus spécifique : petite sonde quelques kb = µremaniements (syndrome de Prader Willy, empreinte parentale, 15q) mais il faut une orientation clinique pour pratiquer cette opération - M-FISH : combinaison de 1 à 3 fluorochromes choisi parmi 5 pour colorer l'ensemble du caryotype et permet d'identifier des chromosomes dérivés et identifier les petits chromosomes surnuméraires marqueurs - ADN du sujet marqué avec fluorochrome comme sonde hybridée avec ADN référence. [...]

[...] Autosomes : - Monosomie : aucunes viables - Seules 3 trisomies potentiellement viables : et 21 - Cas particuliers : 49, XY, +mar, +mar, +mar : marqueurs sans conséquences le plus souvent : bras court d'acrocentrique Mais des fois, déséquilibre en gène : gain b. Anomalie de structure des chromosomes : i. Translocations réciproques = échanges de matériel entre 2 chromosomes : viables mais œuf déséquilibré ii. Translocations robertsonniennes = fusion centromérique de 2 chromosomes acrocentrique : 45 chromosomes sans conséquences iii. Inversions : segment inversé - paracentrique : point de cassure sur le même bras : équilibré et ne peuvent pas se transmettre - péricentrique : centromère emporté : index centromérique très souvent changé. [...]

[...] Obtention du caryotype : a. Techniques chromosomiques : - Culture (milieu de + en + sophistiqués, étude CO2 pour culture longue supérieur à 72h pour neutraliser le pH perturbé par les déchets du métabolisme cellulaire ; avec facteurs de croissance, antifongique ; saturé en vapeur d'eau pour laisser les cellules se diviser ; facteurs mitogènes PHA : Phyto hémagglutinine qui induit la mitose, cellules trophoblastiques rentrent en mitose) - Blocage des cellules en métaphase (colchicine = poison du faisceau mitotique) - Choc hypotonique (KCl pour éclater les membranes et libérer les chromosomes) - Fixation (acide acétique / méthanol pour préserver la structure des chromosomes) - Etalement sur lame - Marquage en bandes : o traitement par : trypsine (GTG) = enzyme protéique qui va dégrader certaines nucléoprotéines et d'autres non (bande G par traitement à la Trypsine avec coloration Giemsa) chaleur (RHG) lames dans bains marie, entraine dissociation des 2 chaines à certains endroits = reverse, chaleur coloration Giemsa o bandes sur chromosomes, caractéristiques d'une paire (bras long) o en rapport avec : nature des protéines associées degré de compaction nature des nucléotides - Observation (au microscope optique) recherche des métaphases - Saisie des métaphases (caméra numérique) - Classement des chromosomes, traitement d'images : o fonction de la taille taille intermédiaire et Y très petit) / forme (index centromérique) / bandes o (existence d'une nomenclature) b. [...]

[...] Classement : - Classement des chromosomes : groupes) o A = et 3 o B = 4 et 5 o C = 6 à 12 + X o D = et 15 o E = et 18 o F =19 et 20 (petites croix) o G =21 et 22 - Notion de : o Numéro du chromosome o bras court long q o régions o bandes o sous-bandes o EX : 18q Le caryotype normal : - Spécifique de l'espèce et du sexe - Chez Homme : o 2n chromosomes = 46 o 22 paires d'autosomes o 2 gonosomes : XX chez femme / XY chez homme 5. Interprétation du caryotype : Il faut répondre à toutes ces questions : - Nombre de chromosomes ? - Structure des chromosomes ? - Equilibre / déséquilibre ? - Homogène / mosaïque ? [...]

[...] Anomalie homogène ou en mosaïque : i. Homogène : dans toute les cellules, résulte d'un accident de méiose chez l'un des parents : œuf trisomique ou monosomique : 95% des œufs éliminés avant l'implantation ii. Mosaïque : fonction du type d'accident, dans division mitotique de l'œuf, et du moment de l'accident. Contexte qui survient lors du développement. anomalies placento- villositaires mosaïque d'organes IV) Compaction de la chromatine : Compaction de la chromatine très variable. [...]