Méthodes d’étude, cellule, immunocytochimie, immunohistochimie, colorations
L'immunocytochimie :
- permet de détecter des protéines au sein d'une architecture cellulaire
- permet de détecter des protéines à l'aide d'anticorps spécifiques couplés à des fluorochromes, des billes d'or ou des enzymes selon le type de microscopie envisagée.
[...] Les anticorps : - c'est une protéine il est donc constitué d'acides aminés - un Ac se fixe spécifiquement sur un site antigénique : l'épitope - il peut être monoclonal ou polyclonal - Un Ac secondaire permet de faire une détection indirecte. - Les Ac peuvent être produit par le foie, les lymphocytes B circulants. Les techniques d'études de la cellule : FRET - le FRET permet de déterminer une interaction entre deux molécules marquées par des fluorochromes quand ceux ci sont proches de moins de 10 nm. [...]
[...] FRAP - Le FRAP permet de déterminer la mobilité d'une molécule au sein de la cellule. - Le FRAP permet d ‘étudier la mobilité d'une molécule dans une cellule vivante après marquage avec un Ac spécifique couplé à un fluorochrome La cytométrie en flux - La cytométrie en flux se fait sur cellule vivante et sur cellule morte (au cours de l'apoptose par exemple) - La cytométrie en flux permet d'étudier la répartition d'une population de cellule dans le cycle cellulaire après marquage de l'ADN par l'iodure de propidium - La cytométrie en flux permet d'étudier l'expression d'une protéine dans une population de cellules. [...]
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