Dans ce cours vous verrez en détails le mécanismes du développement des plantes via des exemples de dicotylédone et de monocotylédones. Sont également détaillé dans ce cours, plusieurs mécanismes de transformation génétique des plantes : mutagenèse (chimique ou insertionnelle), transgenèse (transfert direct et indirect) ainsi que leur utilisation.
[...] Donc, toute mutagenèse se faisant au hasard, il y a plus de chance que les mutations affectent une séquence codante dans ce petit génome que dans un grand. Le choix d'Arabidopsis s'est imposé d'abord pour cette raison d'efficacité des mutagenèses. La petite taille de son génome favorise de plus sa saturation avec des marqueurs et donc l'établissement de cartes génétique et physique, la manipulation de banques d'ADN génomique et a permis son séquençage (le premier génome végétal séquencé : fini en décembre 2000). [...]
[...] Il existe différents gènes rapporteur. Un des deux gènes rapporteurs les plus fréquemment utilisés est le gène uidA (gus) qui code pour une -glucuronidase d'origine bactérienne. Cette enzyme est capable de transformer son substrat incolore (X-gluc) en un produit coloré en bleu. Le second gène, GFP codant pour une protéine fluorescente verte détectable quand on l'observe sous microscope à fluorescence. Les deux techniques présentent des avantages et des inconvénients. L'un des avantages de la GFP par rapport à GUS est la possibilité de l'observation in vivo. [...]
[...] Cette étude par fusion transcriptionnelle reflète l'activité de promoteurs. La localisation de la protéine codée par le gène sera recherchée en réalisant une fusion traductionnelle qui consiste à placer la séquence codant du gène rapporteur en fusion traductionnelle avec celle du gène à étudier, l'ensemble étant sous le contrôle du promoteur de ce gène. La fusion des deux cadres de lecture se fait en éliminant le codon stop du premier et de manière à ce que le cadre de lecture soit ininterrompue jusqu'au codon stop du gène rapporteur. [...]
[...] La transformation stable consiste en l'intégration du transgène dans le génome de la cellule végétale permettant ainsi sa réplication et sa transmission à la descendance. Suivre l'expression de gènes rapporteurs placés sous le contrôle du promoteur du gène faisant objet de l'étude. Pour cela, une construction transcriptionnelle dans laquelle la séquence codante du gène rapporteur est placée sous le contrôle du promoteur à étudier, puis introduite dans un tissu végétal. Ce type d'étude peut se faire soit de façon transitoire ou stable. [...]
[...] La galle du collet (tumeur végétale) est une maladie connue depuis l'antiquité qui affecte de nombreuses plantes cultivées telles que la vigne ou les arbres fruitiers. La bactérie Agrobacterium infecte naturellement certaines espèces végétales, principalement des dicotylédones. L'infection a lieu suite à la blessure de la plante qui produit des composés phénoliques (réaction de défense normalement). Certains de ces composés attirent plutôt Agrobacterium qui va pouvoir s'attacher aux cellules végétales et transférer l'ADN-T du plasmide Ti dans les cellules végétales. [...]
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