Biochimie des virus

Thèmes abordés

Biochimie, biologie moléculaire, virus, acides nucléiques, matériel biologique, cellule animale, manipulation génétique, ADN, chimère, génétique

Résumé du document

La première molécule chimérique a été créée par Paul Berg et son équipe de l'Université de Stanford en 1972, à partir d'un gène de virus de singe SV40 qu'il a introduit dans une bactérie. Cette étude a pu être menée grâce à la découverte de l'ADN ligase.

Extraits

[...] SDS qui va destructuré la membrane plasmique. - Procaryotes : - Bactéries ou Virus Cellules vivantes ou matériel frais : Cryopréseration ; Cryoconservateur : conservation de cellules à des températures basses (glycérol,DMSO). Culots secs: on fait sécher les cellules Cas du sang : ( TD : Extraction ADN de lymphocytes Bet T d'un échantillon de sang Cellules mortes : Technique d'isolement de l'ADN de tissus paraffinés. PCR pour l'étude des ADN dégradés. Qualité : ADN : DO 260nm et électrophorèse. [...]

[...] Biochimie des virus Introduction 1/La biologie moléculaire : Objectif : Produire des gènes et des protéines recombinées. Ces nouvelles molécules sont dites chimériques. - Génie Génétique / Genetic engineering - Recombination DNA technology / Gene manipulation - Gene cloning / Genetic modification - New genetic Le terme "recombinés" signifie que ces molécules n'existent pas dans la nature, mais qu'on va pouvoir en créer en expérimentation. Ces molécules sont aussi dites chimériques. Génie génétique : Mise en place de techniques permettant de construire des molécules qui n'existent pas. [...]

[...] Ces manipulations génétiques sont utilisées dans : - La recherche des bases qui constituent la structure des gènes (séquençage). - La détermination de la fonction des gènes - La production améliorée de protéines bénéfiques pour l'Homme (protéines recombinées). - La production de plante et d'animaux transgénique (OGM). - La construction de banques génomiques et d'ADNc. La Bioéthique : Textes de loi qui posent des limites à ce que l'on peut faire ou ne pas faire avec les gènes ou l'ADN. Matériel biologique ADN : - Eucaryotes : ? Cellules végétales (en colorant avec du vert de méthyle). [...]

[...] Extraction et isolement des acides nucléiques ADN : Lyse des cellules ; Séparation phénol-chloroforme ; Centrifugation ; Prélèvement du surnageant ; Ajout éthanol à froid + acétate de sodium (Précipitation le sel va annuler les charges de l'alcool et de l'ADN pour les rapprocher. ARN : Lyse des cellules avec le sel de guanidium; Précipitation des protéines grâce du phénol acide permet l'extraction de l'ARN qui est dans le surnageant. Plasmide : Isolement par gradient sur chlorure de césium. Séparation par différence de densité. Tissu paraffinés : Prélèvement ; Fixation; Déshydratation ou Placement dans l'azote froid; Inclusion du tissu dans la paraffine; Coupe au microtome; Etalement et collage des coupes; Daparaffinage; Coloration; Déshydratation; 10/ Montage. [...]