Caractérisation phénotypique, biochimique et moléculaire de mutants d'arabidopsis thaliana affectées dans la biosynthèse des flavonoïdes

Résumé du document

A partir de trois types de mutant d'arabidopsis thliana, mutation par insertion du promoteur 35S ou d'ADNt ou mutation chimique, une analyse phénotypique, biochimique et moléculaire permet de mieux connaître les voies métaboliques en vue de faire des modification génétique pour maîtriser la synthèse des métabolites secondaires.

Extraits

[...] La mutation chimique qui touche le mutant B n'empéche pas la synthése de l'ARN mais l'un d'entre eux est non fonctionel Conclusion: Le mutant A correspond à une activation Tagging. L'apparition de nervures violettes montre l'ouverture d'une nouvelle voie métabolique des antocyanes. Le kamferol peu donner de la quercetine en ajoutant un groupement OH. Le mutant Bcorrespond à la mutation chimique qui crée une perte de fonction. Le mutant C correspond à la perte de fonction par insertion ADNt mais les résultats de l'analyse moléculaire ne coresspond pas à l'analyse biochimique car il y a présence de Kampferol mais il n'y a pas les ARN des enzymes impliquées dans la voie de synthése. [...]

[...] Caractérisation phénotypique, biochimique et moléculaire de mutants d'arabidopsis thaliana affectées dans la biosynthèse des flavonoïdes Objectif : Trouver grâce à différentes analyses les gènes impliqués dans la voie de biosynthèse des flavonoïdes ainsi que leurs fonctions. Broyage+ Tampon extraction(inactive RNAse)‏ Récuperation surnageant Gel silice contenant ARNs Élution RNAse free Extraction ARNs Tissu ARNs ADNc PCR C4H, CHS, DFR RT Wt A B C C4h Chs Dfr Ef1 Le mutant A surexprime C4h, Chs,DRF Mutant d'insertion avec P35S Le mutant B a une expression normal Mutant chimique Le mutant C n'exprime plus C4h, Chs,DRF Mutant d'insertion ADNt Perspectives: Ces métabolites secondaires qui se trouvent dans la partie aerienne de la plante jouent un rôle dans sa protection.Mieux connaitre les voies métaboliques permettrai modifier génétiquement la plante pour maîtriser la production de ces métabolites. [...]