Préparation de l'albumine et des immunoglobulines gamma

Résumé du document

On regroupe sous le terme de dérivés sanguins, l'ensemble des dérivés thérapeutiques obtenus à partir d'un don de sang total, d'un don de plasma ou d'un don de cellules sanguines prélevées par cytaphérèse. Chacun de ces dérivés est le résultat de la séparation des constituants du sang par des procèdes physicochimiques.

Parmi ces produits sanguins, on distingue l'albumine et les immunoglobulines G (gamma), ce sont les protéines plasmatiques les plus abondantes, dont la concentration peut subir de nombreuses variations physiologies et pathologiques.

Le fractionnement plasmatique consiste a préparer ces produits thérapeutiques en s'appuyant sur des techniques fines et performantes aboutissant a un meilleur rendement tant sur le point quantitatif que qualitatif. Quelques-unes de ces techniques ont été mises en oeuvre dans notre laboratoire. Il s'agit de la méthode de précipitation à l'aide de sulfate d'ammonium et de la chromatographie par échange d'ions. Nous avons tenté d'intégrer ces dernières dans un schéma opérationnel continu qui partant du plasma, conduit a la production des IgG et de l'albumine a usage analytique et thérapeutique (...)

Extraits

[...] La concentration physiologique chez l'adulte est de 10 -14 mg/ml. Ce sont des anticorps à action prolongée contre des antigènes solubles : antibactériens, antiviraux, anti-Rh, etc. Leur masse moléculaire est de 155000 daltons et leur coefficient de sédimentation est proche de 7S. Sur le plan structural, les IgG sont formées d'associations de chaînes polypeptidiques qui résultent de l'assemblage de domaines conrespondant à un enchaînement de 110 acides aminés (deux domaines pour les chaînes légères domaines pour les chaînes lourdes). (Figure 2). [...]

[...] Résultats et discussion Les résultats de la précipitation des IgG et de l'albumine à partir du plasma humain et bovin à des saturation optimum de 40% et 80% o,t permis d'obtenir des rendements en IgG humaine et bovine de l'ordre de 69% et 70% respectivement, l'albumine humaine et bovine a donné lieu à des rendement respectifs d'environ 74%. Les profils électrophorétiques des précipités des IgG et de l'albumine révèlent la présence de différents contaminants. (Figure 3a, b et dans des proportions de l'ordre d'environ de 30% et 25% respectivement reparties entre les différentes autres fractions protéiques. [...]

[...] Parmi lesquels l'albumine et les immunoglobulines G. Ce sont des produits sanguins stables qui peuvent être préparés industriellement par fractionnement de plusieurs milliers de litres de plasma provenant de milliers de dons de sang. Leurs production est basée sur des critères de qualité très réglementés, de la sélection des donneurs, passant par le dépistage des virus, jusqu'aux procèdes de fabrication qui doivent comportés des traitements d'élimination et d'inactivation viral par des méthodes validées. La préparation de ces produits est basée sur des méthodes de fractionnement qui s'appuient sur des techniques de précipitation permettant une séparation des principales protéines plasmatiques (l'albumine et les IgG), et sur des techniques chromatographiques basées sur différents principes (chromatographie par échange d'ions, d'affinité ) qui occupent une place de premier choix dans l'extraction fine de ces protéines. [...]

[...] (Turbiquant® Imunoglobulinas, Espagne). Les molécules d'IgG contenues dans les fractions préparées forment un complexe immun entraînant une augmentation de l'absorption lumineuse mesurée par photométrie (TurbiTimeSystem) (17). Ce dosage a été réalisé au niveau du laboratoire central du CHU de Sétif. b. Analyse qualitative Par électrophorèse Sur gel de polyacrylamide en présence de SDS L'électrophorèse sur gel de polyacrylamide en présence de SDS utilise un système multi physique comportant deux types de gel superposés, le gel inférieur de séparation à 10% et le gel de concentration à dans ces conditions les protéines sont séparées selon leurs poids moléculaires. [...]

[...] Cependant, la fraction anormale peut être en quantité inférieure dans certains cas. Une bisalbuminémie n'a pas de conséquence pathologique, mais certains variants de l'albumine ont une affinité perturbée pour certaines hormones, ions métalliques, acides gras, médicaments ou colorants (bleu de bromophénol) Les pseudo- bisalbuminémies acquises ne sont observées que de façon transitoire et sont liées soit à la liaison de l'albumine aux antibiotiques de type b-lactame ou à certaines immunoglobulines monoclonales, soit à une protéolyse pancréatiques limitée de l'albumine Utilisations thérapeutiques L'albumine est utilisée en thérapeutique sous forme de solutions iso- oncotiques à (concentration identique au plasma) ou sous forme concentrées à Le choix entre les différentes concentrations et présentations d'albumine sera en fonction de l'étiologies et du degré de l'hypovolémie, de l'état d'hydratation et de la natrémie du patient ainsi que ces antécédents médicaux (en particulier cardio-vasculaires) ; il repose sur la recherche de la meilleure adéquation entre les objectifs de la perfusion d'albumine (remplissage vasculaire ou augmentation de l'albuminémie, caractère hyper- ou iso- oncotique, apport sodé). [...]