Les rats mis à notre disposition sont tous des rats mâles. Afin de les anesthésier, nous injectons de l'uréthane à 5 % (pour un poids de 100g du poids rat, on utilise 2.5 ml d'uréthane) par voie intra-péritonéale.
Lors de la dissection, nous devons surveiller :
- les signes de réveils, en début d'expérience : moustaches qui bougent, mâchouillements, réaction à la douleur (test en piquant ou pinçant la patte) ;
- les signes de souffrance respiratoire : raclement ou ronflement au moment de la respiration ; si c'est le cas il faut installer une sonde au niveau de la trachée (trachéotomie)
L'anesthésie entraine une hypothermie, il faut donc garder l'animal au chaud avec la lampe, qui nous permettra aussi de bien voir lors de notre dissection.
II. Contention et champ opératoire
L'animal est placé sur le dos, fixé par des lacés noués au dessus de l'articulation des pattes antérieures et postérieures à la planche de contention. Les membres antérieurs ne doivent pas être trop tendus (...)
[...] Notre but est d'isoler la veine jugulaire qui apparaît sous la peau au niveau des muscles sterno-cleïdomastoidiens. Elle parait flasque au niveau de la dissection et rouge très foncé. La manipulation pour placer la canule s'effectue de la manière suivante : Décoller la veine du tissu conjonctif à l'aide des pinces fines surtout pas de ciseau) Frotter la veine avec du coton sec pour enlever les tissus fibreux Maintenir le champ opératoire humide en mettant régulièrement du sérum physiologique (solution isotonique) La veine doit être dégagée, de la bifurcation céphalique au triangle cardiaque Placer deux ligatures L1 et L2 qu'on ne serre pas de suite (L1 doit être le plus haut possible, en dessous de la bifurcation et L2 le plus bas possible, au dessus du triangle cardiaque) Serrer L1 de façon à ce qu'il n'y ait plus de sang qui arrive Faire une incision en biais (pointe vers le cœur) dans la veine avec le ciseau, le plus proche de L1 Dégager un petit clapet Faire entrer la canule en métal dans la veine, en direction du cœur (le bas vers la queue) Enfoncer suffisamment pour rejoindre L2 Serrer L2, et caler la canule avec du coton Vérifier le bon fonctionnement de la canule en injectant 0.2 ml de sérum physiologique Insérer le produit qu'avec la seringue surtout pas avec l'aiguille) IV. [...]
[...] Prélèvement d'un échantillon de sang Préparer un tube avec une petite goutte d'héparine pure et un tube poubelle Couper au ciseau la fermeture du cathéter Manipulation à 4 mains Placer le côté coupé pointue du cathéter dans le tube poubelle Desserrer le clamp (fonctionne comme un robinet) jusqu'à évacuation totale du NaCl hépariné (échantillon contaminé) dans le tube poubelle Resserrer le clamp Mettre le tube contenant l'héparine pure et desserrer le clamp pour obtenir l'échantillon Quand le prélèvement est terminé, rincer le cathéter (seringue + aiguille) avec du NaCl hépariné. Pour ce faire, introduire l'aiguille dans le cathéter, relâcher le clamp et introduire le NaCl hépariné jusqu'à ce que le cathéter redevienne blanc. Enfin refermer le Clamp. [...]
[...] Soulever les deux glandes salivaires qui tiennent avec du tissu conjonctif / Le champ opératoire est la zone où la dissection doit être la plus petite possible, l'incision doit donc être limitée. III. Mise en place d'une canule dans la veine jugulaire La mise en place de la canule doit se faire rapidement de façon à éviter que la veine ne se collabe. La canule sert à injecter des produits dans la voie sanguine côté veineux (dans tous les organes à partir du cœur), et permet de sacrifier le rat en injectant de l'air embolie gazeuse). [...]
[...] Anesthésie Les rats mis à notre disposition sont tous des rats mâles. Afin de les anesthésier, nous injectons de l'uréthane à (pour un poids de 100g du poids rat, on utilise 2.5 ml d'uréthane) par voie intra-péritonéale. Lors de la dissection, nous devons surveiller : - les signes de réveils, en début d'expérience : moustaches qui bougent, mâchouillements, réaction à la douleur (test en piquant ou pinçant la patte) ; - les signes de souffrance respiratoire : raclement ou ronflement au moment de la respiration ; si c'est le cas il faut installer une sonde au niveau de la trachée (trachéotomie) L'anesthésie entraine une hypothermie, il faut donc garder l'animal au chaud avec la lampe, qui nous permettra aussi de bien voir lors de notre dissection. [...]
[...] Contention et champ opératoire L'animal est placé sur le dos, fixé par des lacés noués au dessus de l'articulation des pattes antérieures et postérieures à la planche de contention. Les membres antérieurs ne doivent pas être trop tendus. La tête est tenue grâce à un élastique relié aux incisives. L'ouverture se fait du côté ventral. / Avant de commencer la dissection il faut avoir préparé le cathéter (cf partie IV.1) et vérifier que la canule ne soit pas bouchée. [...]
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