Etude comparative du profil protéique de différents tissus

Résumé du document

Synthèse de Biologie niveau Licence étudiant les variations qualitatives et quantitatives du profil protéique de différents tissus chez les mammifères (rat) et relevant l'existence d'une ou de plusieurs protéines que l'on peut mettre en rapport avec les protéines liées à la spécificité tissulaire.

Extraits

[...] Pour modifier le degré de polymérisation on peut jouer sur les concentrations en acrylamide et bis-acrylamide. Condition de l'expérience : Les différentes solutions mères disponibles : - Mélange Acrylamide Bis-Acrylamide - Tampon Tris-HCl 1,5 M pH 8,8 - Tampon Tris-HCl 0,5 M pH 6,8 - Une solution de SDS à 10%. - Une solution de persulfate d'ammonium (APS) à 10%. - TEMED. Les pourcentages des solutions mères utilisées pour chaque gel : Figure 8 : tableau des pourcentages des solutions mères utilisées. [...]

[...] - Peser chaque tissu. Figure 2 : montre le poids moléculaires par pesé ainsi le volume total ajouté. - Ajouter 3 volumes du tampon Tris-HCl 25mM ; pH 7,5 ; EDTA 2mM ; β- mercaptoéthanol 10mM. - Réalisé broyage des tissus par homogénéisateur Potter. - Déposer l'homogénat dans des Eppendorf. - Centrifuger 15mn à rpm. - Recueillir le surnageant que l'on peut conserver 4°C. Les concentrations protéiques des extraits préparés par la méthode colorimétrique de Bradford (utilisée pour le dosage des protéines). [...]

[...] * Indice de la dilution utilisée pour chaque extrait. analyse des extraits protéiques par électrophorèse en gel de polyacrylamide en présence de SDS. Avant d'être soumises à l'électrophorèse, les protéines sont d'abord dénaturées par le β-mercaptoéthanol en excès qui réduit les ponts disulfures S-S et par le SDS (Sodium Dodecyl Sulfate) qui en se fixant sur les chaines polypeptidique provoque la rupture des liaisons ioniques, hydrogènes, hydrophobes. Dans ces conditions on admet que : - la charge par unité de masse du complexe polypeptide-SDS est constante. [...]

[...] Figure 12 : tableau représente la mobilité protéique du témoin. Figure 13 : graphe de la mobilité protéique en fonction de Log MM - Selon l'équation on peut déterminer la mobilité protéique de chaque bonde. - On va prendre les bandes qui sont bien exprimé. Figure 14 : tableau de la mobilité protéique des bandes. IV- Interprétation des résultats De point de vue des résultats obtenus on peut conclure que selon l'ordre quantitatif et qualitatif le foie présente une grand quantité des protéine est ces normale puisqu'il est responsable de nombreux réaction métabolique de l'organisme et qui sont vitale (sont entrer en détailler) , donc leur taille importante a réduit la vitesse de migration des protéine suivie par le rein qui possède quantité importante mes reste faible par rapport au foie ce qui a entrainer migration moyenne des protéine par rapport au foie, suivie par le cerveau qui contient des protéine mes de courte taille montrer par la vitesse rapide de migration et en fin de compte le cristallin qui possède quantité faible de protéine et de taille très réduit montrer par le vitesse rapide de migration car le cristallin ce trouve dans l'œil présente faible protéine car crèvent seulement a la vision et transmission de message. [...]

[...] II- But : Le but de la manipulation est d'étudier les variations qualitatives et quantitatives Du profil protéique de différents tissus chez les mammifères (rat) et de relever l'existence d'une ou de plusieurs protéines que l'on peut mettre en rapport avec les protéines liées à la spécificité tissulaire. III- Matériel biologique : Il est constitué par des tissus de différents organes (foie, rein, cerveau, cristallin d'œil). préparation des extraits protéiques - Anesthésier les animaux. - Ouvrir la cavité abdominale des animaux. [...]