Identification de deux souches pures de cocci à Gram positif

Résumé du document

Toutes les étapes suivantes seront réalisées selon les bonnes pratiques de laboratoire et notamment selon les règles propres à la bactériologie afin d'éviter toute contamination infectieuse.

Un test préliminaire nommé test de la catalase est réalisé. Ce test sert à détecter la présence de cette enzyme dans une souche bactérienne donnée. Il consiste essentiellement à exposer les cellules bactériennes au peroxyde d'hydrogène sur une lame de verre ; la présence de catalase se remarque par la formation d'un dégagement gazeux sous forme de bulles (d'oxygène) (...)

Extraits

[...] Le milieu mannitol est jaune : il est donc fermenté. Le choix se limite a deux espèces du genre Staphylococcus : aureus et saprophyticus. Le plasma de lapin oxalaté est pris en masse : la coagulase est donc présente. Il s'agit donc d'un staphylocoque du genre aureus. CONCLUSION Ces observations préliminaires et secondaires sont utiles pour identifier rapidement des bactéries inconnues. Il en existe bien d'autres spécifiques chacun à la mise en évidence d'une caractéristique particulière à un genre ou espèce donné. [...]

[...] Ces tests d'identification sont utilisés dans une large mesure. Ainsi, ces méthodes d'identification rapide ont-elles été mises au point pour les déterminations médicales et vétérinaires et aussi pour l'industrie alimentaire. Exemple de compte-rendu TP : Reconnaissance de bactéries BUT On cherche à observer quatre bactéries au microscope pour déterminer leurs caractéristiques générales. MATÉRIELS ET MÉTHODES On dispose de quatre souches supposées pures. Les lots et 4 sont cultivés sur boîte de Pétri. Le lot quant à lui, est cultivé en milieu liquide dans un tube à essai. [...]

[...] Parallèlement, chaque souche pure est prélevée et fixée sur lame. Une observation au microscope sous objectif à immersion sera réalisée après coloration de Gram selon le protocole du TP. RÉSULTATS Exploitation des résultats sur le lot Analyse des résultats Après coloration de Gram, on observe au microscope sous objectif d'immersion des bactéries de forme arrondie (coques) et de coloration violette (Gram sur les deux souches A et B. ( Souche A Ces Micrococcaceae sont des aérobies strictes : ils ne peuvent vivre qu'en présence d'air. [...]

[...] Vous ensemencerez les milieux : gélose bile esculine (BEA) pour identifier les streptocoques du groupe D et des entérocoques par piqûre centrale jusqu'au fond tu tube un bouillon hypersalé (BHS) pour l'identification des entérocoques Résultats des tests : - type respiratoire : le milieu est trouble dans la surface de contact avec l'air ambiant avec les aérobies stricts sinon le milieu est totalement trouble avec les aéroanaérobies stricts - milieu mannitol-mobilité : le mannitol est fermenté si l'indicateur rouge a viré au jaune ; la mobilité de ces bactéries se distingue par un trouble en-dehors de la piqûre d'ensemencement - test de la coagulase : le test est positif lorsque le plasma de lapin oxalaté est coagulé - gélose bile-esculine : la présence de streptocoques du groupe D est mise en évidence par le développement d'une coloration noire par présence conjointe de l'esculétine et du citrate de fer (esculine hydrolysée en glucose + esculétine chez ces streptocoques) - bouillon hypertonique : si présence d'un développement bactérien, il y aura des entérocoques Exemple de compte-rendu TP : Identification de 2 souches pures de cocci à Gram positif de la famille des Micrococcaceae BUT On cherche à identifier deux bactéries cocci à Gram positif. On partira de souches pures A et B du lot n°34. Il s'agit essentiellement de comparer les caractères de l'organisme inconnu avec ceux des nombreuses espèces connues jusqu'à trouver une similitude. MATÉRIELS ET MÉTHODES Toutes les étapes suivantes seront réalisées selon les bonnes pratiques de laboratoire et notamment selon les règles propres à la bactériologie afin d'éviter toute contamination infectieuse. Un test préliminaire nommé test de la catalase est réalisé. [...]

[...] Pour la famille des Micrococcaceae, trois tests sont mis en place de manière successive pour chaque souche pure : - test sur gélose viande-foie pour la détermination du type respiratoire après régénération du milieu au bain-marie bouillant pendant 20 minutes ; - test sur gélose mannitol mobilité pour l'étude de la mobilité et de la fermentation du milieu : le test est positif lorsque le rouge de phénol a viré au jaune; - test de la coagulase à partir de plasma de lapin oxalaté : le test est positif lorsque la plasma a pris en masse. Les manipulations sont réalisées selon le protocole du TP. [...]