Les besoins nutritifs des bactéries et les milieux de culture en bactériologie

Résumé du document

Les bactéries cultivées en laboratoire devront trouver, dans le milieu de culture, tous les éléments nécessaires à leur vie : de l'eau, au moins une source d'énergie, des nutriments qui leur permettent de fabriquer les différents constituants cellulaires de la bactérie... Il faut aussi respecter les conditions physico-chimiques adaptées à chaque souche : exigences respiratoires (O2, CO2, pas d'O2), température, pH, pression osmotique du milieu... (...)

Extraits

[...] Une bactérie exigeante en facteur de croissance est dite auxotrophe pour ce facteur et une bactérie qui pousse sans facteur de croissance est dite prototrophe Conditions physico-chimiques nécessaires à la croissance En plus des besoins nutritifs, certains paramètres physico-chimiques interviennent dans la croissance des microorganismes : a. l'atmosphère d'incubation : Certaines bactéries cultivent en présence ou en absence d'oxygène. Exemples : - bactéries aérobies strictes : ne se développent qu'en présence d'air. Leur source principale d'énergie est la respiration. L'oxygène moléculaire, ultime accepteur d'électron, est réduit en eau (Pseudomonas, Acinetobacter, Neisseria). - bactéries anaérobies strictes : ne se développent qu'en absence totale ou presque d'oxygène qui est le plus souvent toxique. [...]

[...] Ces bactéries doivent se cultiver sous atmosphère réductrice. La totalité de l'énergie est produite par fermentation. C'est le cas des bactéries intestinales (Bacteroides, Fusobacterium, Clostridium) et de nombreuses bactéries présentes dans les flores normales de l'organisme. La toxicité de l'oxygène s'explique par la production de radicaux superoxydes que les bactéries anaérobies ne peuvent pas détruire (absence de superoxyde dismutase) et/ou par l'absence d'une activité enzymatique à type de catalases et de peroxydases. b. la température d'incubation : Chaque microorganisme possède une température optimale de croissance, c'est-à-dire une température où sa croissance est la plus rapide. [...]

[...] Deux classifications sont possibles pour les milieux de culture : Selon leur composition a. Les milieux empiriques : milieu mis au point par tâtonnement et dont l'efficacité est prouvée par l'expérience. Sa composition chimique n'est pas exactement connue, contrairement à celle des milieux synthétiques. Ex : gélose nutritive ordinaire b. Les milieux synthétiques : milieu dont la nature exacte des constituants est définie. Il est constitué d'un mélange de substances chimiquement pures. Afin de ne pas apporter d'autres constituants au milieu synthétique, on doit obligatoirement l'ensemencer à partir de bactéries prélevées sur milieu solide. [...]

[...] C'est un polyoside capable d'absorber 300 à 500 fois son poids d'eau donc il a la propriété de gélifier les milieux de culture qui deviennent alors des supports solides. Avantages : - l'agar fond à ébullition et reste liquide jusqu'à 40 - 45°C surfusion) ; - l'agar n'est pratiquement jamais dégradé par les bactéries, c'est donc un support inerte. On distingue 3 types de milieu selon la concentration en agar : - milieu solide avec environ 15g/L (la culture est appréciée par la présence ou l'absence de colonies) ; - milieu semi-solide ou gélose molle avec environ 6g/L ; - milieu liquide (bouillon) sans agar (la culture est appréciée par la présence ou l'absence de trouble) Les éléments nutritifs a. [...]

[...] On les utilise pour la culture de certaines bactéries particulièrement exigeantes qui ne cultivent pas, ou très mal, sur les milieux de bases. Séparer les divers microorganismes contenus dans le prélèvement initial. Peut contenir des molécules permettant une sélection des microorganismes (milieu sélectif) ou ne pas en contenir (milieu non sélectif). Un milieu sélectif est utilisé pour sélectionner au sein d'un ensemble pluri-bactérien complexe, un ou plusieurs groupes bactériens que l'on souhaite étudier. Un milieu d'enrichissement réunit deux caractéristiques : - il contient des molécules à action sélective inhibant totalement ou partiellement la culture des microorganismes non recherchés ou utilise une température d'incubation particulière, ou encore une atmosphère particulière ; - il est liquide (bouillon) afin que son action sélective s'exerce sur une population importante et homogène. [...]