Le lysozyme et ses applications en pharmacie

Résumé du document

Le lysozyme est une enzyme très répandue. Il a été découvert en 1922 par Alexander Fleming qui, souffrant d'un rhume, observa que le mucus nasal détruisait les bactéries sur les boites de Pétri. On trouve le lysozyme chez l'Homme dans le liquide lacrymal, la salive, le sang, l'urine et le lait.

On peut également le retrouver dans le blanc d'oeufs de nombreux oiseaux, le lait de vache, chez certains végétaux, bactéries et virus (tableau 1). Bien que la source la plus riche en lysozyme soit les larmes humaines, l'extraction du lysozyme se fait actuellement à partir du blanc d'oeuf de poule (...)

Extraits

[...] Cunningham F.E., Proctor V.A., Goetsch S.J Egg-white lysozyme as a food preservative: an overview. World's Poultry Science Journal 141-163. Jollès Jollès J Hydrolyse trypsique du lysozyme du blanc d'oeuf de poule réduit : isolement de peptides contenant du tryptophane et de la cystéine. CR Hebd Séances Acad Sci 1109-1111. Jollès P., Thaureaux J., 1956a. Hydrolyse trypsique du lysozyme d'œuf de poule. Structure de quelques peptides séparés par chromatographie sur colonne et enchaînement C-terminal. CR Hebd Séances Acad Sci 1926-1928. Jollès P., Thaureaux J., 1956b. [...]

[...] Van der Plancken I., Delattre M., Indrawati, Van Loey A., Hendrickx M.E.G Kinetic study on the changes in the susceptibility of egg white proteins to enzymatic hydrolysis induced by heat and high hydrostatic pressure pretreatement. J. Agric. Food Chem Vanaman T.C., Brew K., Hill R.L The disulfide bonds of bovine α-lactalbumine. J. Bio Chem 4583-4590. Sava G Pharmacological aspects and therapeutic applications of lysozymes. EXS 433-449. [...]

[...] De plus, des réactions immunologiques croisées montrent que le lysozyme et l' α lactalbumine possèdent des structures tertiaires très différentes. En effet, il n'y a aucune réaction entre un anticorps anti-lysozyme et l'alpha lactalbumine et aucune réaction entre un anticorps anti-alpha lactalbumine et le lysozyme (Vanaman, 1970). Toutes ces ressemblances laissent supposer qu'il existe une relation phylogénétique entre ces deux protéines, les deux protéines dérivant probablement de la duplication d'un gène ancestral (Brew, 1967) Figure 3 : Comparaison des structures primaires du lysozyme et de l'α lactalbumine. D'après Vanaman et col (1970). [...]

[...] Le rapport Trp / LNAA est de 0,331 (contre 0,170 pour l'α lactalbumine). La séquence peptidique est représentée figure 4. Figure 1 : Structure du lysozyme du blanc d'œuf de poule. (Reproduit à partir de Canfield R.E. et Liu A.K., 1965) B. Activité enzymatique Le lysozyme possède une activité enzymatique (E.C. : Il s'agit d'une activité bactériolytique par hydrolyse des liaisons β 14 entre l'acide N-acétylmuramique (NAM) et la N-acétylglucosamine (NAG). Ces deux composants forment la paroi bactrienne (aussi appelée peptidoglycane ou muramine) des bactéries à Gram positif (voir figure 5). [...]

[...] L'hydrolyse par la chymotrypsine et par la pepsine du lysozyme réduit carboxyméthylé (Canfield, 1964) libère respectivement 9 et 7 peptides contenant un résidu tryptophane Traitement du lysozyme Enzyme Rapport E pH Durée 1 Réduction Trypsine 37°C 6h 18 peptides tryptophane 2 Dénaturation 1 heure à 100°C Trypsine 37°C 6h 8 peptides, tryptophane 3 Oxydation par l'acide performique Trypsine 37°C 6h 17 peptides 4 Aucun Pepsine 37°C 1h Résultats dont un 3 contenant du seul contenant du 2 peptides antimicrobiens dont contenant un résidu tryptophane Hydrolysé par pepsine (voir Trypsine 37°C 6 Réduit carboxyméthylé Trypsine ou 90 à peptides 37°C tryptophane min 7 Réduit carboxyméthylé Pepsine Acide 23°C 60 min 27 peptides dont 10 ayant une réponse positive au dosage du tryptophane* 8 Réduit carboxyméthylé Chymotrypsine 37°C 2h 32 peptides dont 7 ayant une réponse positive au dosage du tryptophane* 9 αChauffage entre 50 et 18,6 80°C chymotrypsine BTEE-U 8,0 37°C 10 min Trypsine 2310 BAEE-U 8,0 37°C 10 min 7,5 37°C 24 h 2 peptides antimicrobiens dont contenant 2 résidus tryptophane Acide 37°C formique 16 h 32 peptides dont 11 ayant une réponse positive à la révélation du tryptophane 10 Chauffage entre 50 et 80°C 11 Aucun Clostripaïne 10 unités / mg 12 Aucun Pepsine nuit dont 4 contenant du Degré d'hydrolyse plus important quand prétraitement par chauffage références 1 Jollès P et Jollès J * résultat positif à la réaction d'Ehrlich 2 Jollès P et Thaureaux J Jollès P et Thaureaux J et 5 Mine Ma et Lauriau S Canfield J bio chem et 8 Canfield R et Anfinsen C et 10 Van der Plancken Delattre et col Pellegrini Thomas U et col Canfield Liu J bio chem Tableau Conditions d'hydrolyse du lysozyme selon différents auteurs 8 III. Références Awade A.C Le lysozyme : agent naturel pour la conservation des aliments. [...]