Identification de deux souches pures de bacilles à Gram négatif

Résumé du document

Un test préliminaire nommé test de l'oxydase est réalisé. Ce test détecte un type particulier de chaîne respiratoire qui comporte en fin de chaîne un cytochrome c et l'oxydase associée. Du papier filtre est humecté du réactif de Kovacs (attention, cette substance est sensible à la lumière ; à préserver dans un tube entouré de papier d'aluminium) et on y étale une petite quantité de matériel bactérien. Si le test est positif, le réactif s'oxyde pour donner une couleur violette (...)

Extraits

[...] Le code obtenu peut être alors recherché dans le fichier informatif API®. À partir de là, vous obtiendrez directement le genre et l'espèce en question. Si aucune combinaison ne coïncide, réinterprétez chacun des tests. Il peut s'agir soit d'une erreur de votre part, soit d'un test dont le résultat est à cheval entre positif et négatif, soit d'une mauvaise réalisation du test, soit de la présence d'une espèce non pure. ( Code : souche non présente sur le catalogue API mis à disposition À partir du tableau d'identification API, on en déduit que nous sommes face au bacille Serratia marcescens. [...]

[...] I Identification de 2 souches pures de bacilles à Gram négatif BUT On cherche à identifier deux bacilles à Gram négatif. On partira de souches pures A et B. Il s'agit essentiellement de comparer les caractères de l'organisme inconnu avec ceux des nombreuses espèces connues jusqu'à trouver une similitude. MATÉRIELS ET MÉTHODES Un test préliminaire nommé test de l'oxydase est réalisé. Ce test détecte un type particulier de chaîne respiratoire qui comporte en fin de chaîne un cytochrome c et l'oxydase associée. [...]

[...] Une réaction positive se traduit par l'apparition d'un anneau rouge à la surface du milieu. Les manipulations sont réalisées selon le protocole du TP. Après l'ensemencement des différents milieux par les inoculums, les tubes sont placés en étuve à 37 pendant 72 h. RÉSULTATS Exploitation des résultats sur la souche A avec la galerie Api® 20E À l'aide de la grille de résultat du système de galerie et du tableau des résultats chromogéniques, on pourra faire la somme des résultats trois par trois. [...]

[...] Pour la souche ils seront réalisés dans une galerie Api® 20E. Le système API® consiste en une galerie de plastique comportant un certain nombre de microtubes qui contiennent chacun un milieu déshydraté différent. Chaque microtube est inoculé avec une suspension de l'organisme à tester. On ajoute de l'huile de paraffine dans certains microtubes. Ultérieurement, on ajoute des réactifs pour détecter des métabolites particuliers. Pour la souche on réalise plusieurs tests : - test sur gélose mannitol mobilité : le test sera positif lorsque l'espèce présente fera virer l'indicateur coloré (rouge de phénol) en jaune par acidification du milieu - test sur milieu Kligler-Hajna : pour les bacilles lactose négatif, il faudra rechercher la ß-galactosidase à l'aide des disques d'ONPG (orthonitrophényl- ß-galactoside). [...]