Etudes fonctionnelles sur modèle cellulaire

Thèmes abordés

études fonctionnelles, modèle cellulaire, molécules biologiques, précurseurs radioactifs, bio-molécules

Résumé du document

Le but de ces études va être :
- de suivre les synthèse de molécules biologiques
- mais aussi de localiser ces bio-molécules dans les cellules.
Pour cela il y aura d'abord incorporation de précurseurs radioactifs dans les cellules.
Ces précurseurs seront ensuite utilisés pour la synthèse de molécules biologiques comme par exemple l'ADN, l'ARN ou bien des protéines.
Enfin il y aura observation par microscopie de ces bio-molécules devenues radioactives.

Extraits

[...] Propulsion de micro-projectiles recouverts d'ADN Dans cette méthode on utilise un canon à ADN qui permet d'envoyer à très grande vitesse des billes d'or ou de tungsten recouvertes d'ADN sur les cellules en culture. La très grande vitesse des billes leur permet de traverser la membrane plasmique. Conclusion On a vu 2 techniques. Pour la radioactivité c'est un outil qui reste irremplaçable en raison de sa très grande sensibilité. Quant à la manipulation génétique c'est un outil moderne et qui devient de plus en plus indispensable par l'étendue des possibilités d'investigation. C'est maintenant une méthode qui devient nécessaire pour le développement de la thérapie génique. [...]

[...] Cet anticorps primaire est lui-même reconnu de manière secondaire par un anticorps secondaire. Et c'est cet anticorps secondaire qui présente le marquage par exemple par un fluorochrome. Les protéines fluorescentes Ces protéines fluorescentes connaissent un très grand développement à l'heure actuelle. Le marquage, l'étiquette ce sera la séquence de cette protéine fluorescente qui sera associée à la protéine d'intérêt et l'exemple le plus connu c'est celui de la protéine GFP. C'est une protéine fluorescente. Elle a d'abord été extraite d'une méduse. [...]

[...] Par exemple on peut étudier : la croissance cellulaire = la prolifération. la mort cellulaire ou plus précisément l'apoptose toutes les voies de signalisation cellulaire. Cette manipulation génétique nécessite l'introduction de macromolécules dans la cellule et cette étape est appelée la transfection Exemples de molécules à transfecter Il peut s'agir : de protéines normales couplées à un fluorochrome d'ARN interférent de l'ADN. Exemple de protéines normales couplées à un fluorochrome C'est un exemple qui concerne le cytosquelette. Il s'agit de la tubuline marquée par un fluorochrome. [...]

[...] Etudes fonctionnelles sur modèle cellulaire I Etude fonctionnelle par radioactivité Le but de ces études va être : de suivre les synthèse de molécules biologiques mais aussi de localiser ces bio-molécules dans les cellules. Pour cela il y aura d'abord incorporation de précurseurs radioactifs dans les cellules. Ces précurseurs seront ensuite utilisés pour la synthèse de molécules biologiques comme par exemple l'ADN, l'ARN ou bien des protéines. Enfin il y aura observation par microscopie de ces bio-molécules devenues radioactives Radio-isotopes et précurseurs radioactifs Les précurseurs radioactifs ce sont des précurseurs de molécules biologiques qui ont incorporés des radio-isotopes. [...]

[...] Donc d'autres techniques sont utilisés pour les cultures de cellules. β. Electroporation Dans cette technique il y a formation de pores transitoires dans la membrane plasmique suite à un choc électrique. Les macromolécules sont ainsi transfectées. Il y a ensuite réparation spontanée de la membrane plasmique, ce qui permet la survie des cellules en culture. Fusion membranaire Dans la fusion membranaire on utilise des liposomes. Des liposomes ce sont des vésicules artificielles présentant une bicouche lipidique. Les molécules à transfecter sont introduites à l'intérieur de ces liposomes. [...]