Cytogénétique moléculaire et le diagnostic pré-implantatoire

Thèmes abordés

Cytogénétique, moléculaire, Diagnostic, pré-implantatoire, DPI

Résumé du document

Historique :
- Première utilisation de l'hybridation in situ en 1969 par méthode radioactive.
- Ward et Van der Ploeg (1982) introduisent la fluorescence : plus facile à utiliser , à stocker , haute résolution , combinaison de fluorochromes.
- Principe: basé sur la capacité de l'ADN à se dénaturer et se renaturer (hybridation).

Extraits

[...] Les domaines d'analyse selon la résolution : Cytogénétique classique : du génome ( 3.5 x109 pb) à la sous-bande (2x106 pb ) Cytogénétique moléculaire : du chromosome (2x108 pb ) au gène (2x104 pb) Biologie moléculaire : de la sous-bande (2x106 pb ) à l'exon (50 à 1000 pb) Historique : Première utilisation de l'hybridation in situ en 1969 par méthode radioactive Ward et Van der Ploeg (1982) introduisent la fluorescence : plus facile à utiliser , à stocker , haute résolution , combinaison de fluorochromes . Principe::basé sur la capacité de l'ADN à se dénaturer et se renaturer (hybridation) Principe de la cytogénétique moléculaire : Besoin d'une sonde marquée : séquence d'oligonucléotides capable de reconnaître une séquence du génome , marquage à l'aide d'un fluorochrome. Cible = chromosome du patient On dénature la sonde et le chromosome, ce qui va permettre à la sonde de s'hybrider sur la région chromosomique pour laquelle elle est complémentaire. [...]

[...] Etude rapide d'un nombre important de cellules : découverte tardive devant signe d'appel écho graphique, permet de préciser une mosaïque , remaniements complexes (ex fusion surtout sur pathologie acquise) Avantages : diagnostic rapide pas de métaphases peut donc compenser un échec de culture, étude ciblée Inconvénients : ne met en évidence que ce qui est recherché pour un risque de ponction identique Analyse des noyaux en métaphase : classiquement après culture de lymphocytes , mais aussi sur prélèvement de moelle ou sur culture de fibroblastes possiblement sur tout tissu qui prolifère Etude des syndromes microdélétionnels = remaniement chromosomique de petite taille (infracytogénétique) . Spécifique d'un syndrome cliniquement identifiable . [...]

[...] Plusieurs syndromes apparentés : Syndrome de DiGeorge : Dysmorphie craniofaciale : visage rond , racine du nez large avec pointe bulbeuse , fentes palpébrales étroites, doigts longs Cardiopathie conotroncale : 75% des patients ont une cardiopathie , anomalie du développement du septum conal tétralogie de Fallot des patients) , interruption de la crosse aortique , communication ventriculaire , tronc artériel commun , autre cardiopathie Hypoplasie du thymus (troubles immunitaires) Hypocalcémie Syndrome vélo-cardio-facial : dysmorphie craniofaciale , cardiopathie conotroncale , fente palatine ou insuffisance vélaire , troubles de l'apprentissage. [...]