La cinétique de la réaction enzymatique

Résumé du document

Cours de biologie sur la cinétique de la réaction enzymatique composé de définitions, d'expérience avec ses commentaires, ses explications, ses interprétations et ses conséquences sur la vitesse initiale, ...

Extraits

[...] On peut confondre [E]totale et ainsi que [S]totale et Dans ces conditions, on démontre que la vitesse de disparition de S est : dS/dt = dP/dt = Vi = Vm x / KM + Cette équation est l'équation de la courbe Vi = f[S]. Vi ( vitesse initiale résultant des réactions et 3. ( concentration initiale en S dans le milieu réactionnel. Vm ( vitesse initiale maximale. KM ( constante de Michaelis = (k2 KM a un rapport avec le complexe ES. Vm et KM sont les constantes cinétiques de l'enzyme. B-Représentations graphiques pour déterminer Vm et KM 1-Vi = Ce graphe est une branche d'hyperbole qui correspond à l'équation : Vi = (Vm x + Lorsque la ( Vi ( Vm. [...]

[...] Ce mode de détermination est théorique, il n'est pas utilisé. 2-Méthode de Lineweaver et Burk On réalise une série d'expérience dans laquelle on détermine la Vi pour différentes Courbe inverse : 1/Vi + x ( (KM/Vm.[S]) + Quand 1/Vi = 0 ( = -1/KM Quand = 0 ( 1/Vi = 1/Vm Mais aussi, 2/Vm ( 1/KM. 3-Signification de Vm et KM A-Signification de Vm Lorsque l'enzyme est saturée en substrat, la Vi est maximale et égale à Vm. Dans des conditions initiales, mesurer Vm c'est doser une enzyme puisque Vm et la sont proportionnelles. [...]

[...] Plus KM est petit, plus la constante d'affinité est grande, plus l'enzyme et le substrat ont d'affinité l'un pour l'autre. KM n'est pas une valeur fixe pour une enzyme donnée, sa valeur dépend du substrat, du pH, de la température KM est la pour laquelle la Vi est = Vm/2. Influence des facteurs physiques IV L'activité enzymatique A-L'unité internationale Une unité internationale est la quantité d'enzyme qui catalyse la transformation d'une µmol de substrat par minute dans des conditions physico-chimiques déterminées. [...]

[...] Remarque : lors d'un processus de purification d'enzyme, l'AES augmente à chaque étape, on calcule l'enrichissement de la purification en comparant les valeurs d'AES à chaque étape. V Effecteurs de la réaction enzymatique A-Définition Les effecteurs sont des substances chimiques autres que les substrats et les enzymes qui modifient l'activité de l'enzyme. Les effecteurs sont répartis en 2 groupes : - les inhibiteurs ( diminuent l'activité de l'enzyme. - les activateurs ( augmentent l'activité de l'enzyme. L'effet d'un effecteur peut être réversible ou irréversible. B-Résultats expérimentaux L'expérience 1 et 2 ont des valeurs de KM égales. [...]

[...] Vi = est une courbe où chaque point est une Vi (1point ( 1 condition particulière). Conséquences : Pour mesurer la V max d'une réaction enzymatique, il faut : - être en début de réaction (pour être en - avoir un très large excès de S (pour que l'enzyme soit saturée). D-Variation de Vi en fonction de 1-Résultats expérimentaux 2-Interprétation Dans les conditions choisies, la est très supérieure à la ce qui signifie que pour chaque essai la vitesse de réaction correspond à la Vi pendant un temps assez long (à voir sur = Tant que la est très supérieure à la Vi = est une droite. [...]