La biotechnologie : biologie moléculaire, transgenèse et OGM

Résumé du document

A quoi servent les OGM ?

La recherche fondamentale :

Les OGM permettent d'étudier la fonction physiologique d'un gène dont on ne connaît que la séquence en paires de base.
Le gène est introduit dans une plante modèle : ARABIOLOPSIS THALIANA.
On le laisse s'exprimer chez cette plante et on observe ses effets.
La plupart du temps, ces gènes de fonctions physiologiques inconnues vont être surexprimés au niveau de la plante hôte, ce qui va permettre de comprendre le fonctionnement de ce gène (...)

Extraits

[...] 1963: YANOFSKY: mutation de l'ADN car changement d'acide aminé dans la protéine. L'ordre des nucléotides de l'ADN définit l'ordre des acides aminés dans la protéine. Année 50: PALADE: démontre l'existence des ribosomes (constitué d'ARN et de protéine). Ribosome: lieu de synthèse des protéines. = lien entre ADN et protéine. 1961: Existence de l'ARN 1966: Code génétique déchiffré. Il aura fallu plus de cinq ans pour démontrer qu'un codon code pour un acide aminé. Enzyme de restriction et révolution technologique des année 70. [...]

[...] *Sur la feuille: Fragments monocaténaires. Puis la feuille est incubée avec une sonde spécifique radioactive. Les molécules d'ADN complémentaire s'hybrident avec la sonde = Formation ADN double brin radioactif *On élimine les sondes radioactives en excès et on soumet la feuille de nitro cellulose à une photo pour révéler la radioactivité. *Pour terminer, on récupère l'ADN complémentaire. -CLONAGE DES GENES Début en 1972. *Isolement d'un gène grâce à une enzyme de restriction *Le gène est inséré dans un plasmide (couper par la même enzyme de restriction) = Obtention bout collant au niveau du plasmide. [...]

[...] Transgenèse artificielle étapes sont nécessaire à sa réalisation: -choix du gène d'intérêt: Pour l'isoler, on coupe L'ADN d'origine grâce à une endonucléase de restriction = Obtention de fragments de différentes tailles. Puis on fait une électrophorèse et un southern blot pour trouver ce gène. Une fois trouver, on fait une PCR pour multiplier le nombre de gènes. -production ADN recombinant: Les fragments sont ensuite insérer dans un plasmide ou dans des vecteurs viraux. On prend un plasmide qu'on fait digérer par une enzyme. = Obtention de bout complémentaire au gène d'intérêt. [...]

[...] -ELECTROPHORESE: Une fois l'ADN coupé grâce aux enzymes de restriction, les fragments sont soumis à une charge électrique dans un gène. Ajout de deux colorants dans les puits: * bleu de servan: migre et délimite les fronts de migration *bromure d'éthydium: se fixe spécifiquement à l'ADN. Il devient violet lorsqu'il est éclairé par les UV. Il permet de révéler la présence des différents fragments d'ADN. Grâce à cette technique, on peut déterminer la séquence en nucléotide. -SOUTHERN BLOT Mise en place par Southern en 1965. [...]

[...] BIOTECHNOLOGIE L'avènement de la biologie moléculaire 1900-1940: la génétique et la biochimie font des bonds. Génétique: MORGAN: théorie chromosomique de l'hérédité on sait que le gène est l'unité de mutation, de recombinaison, de transmission des caractères. On ne connait ni la structure ni le mécanisme d'un gène. Biochimie: élucide les voix métaboliques -Une nouvelle discipline apparait grâce à la rencontre de la génétique et de la biochimie: = La biologie moléculaire Biologie moléculaire: comprendre le fonctionnement des cellules grâce a l'étude des gènes et de leur produits. [...]