Biologie cellulaire : techniques d'observation des cellules

Thèmes abordés

Biologie cellulaire, systèmes biologiques, échelles des dimensions, microscopie, cellule, cellules des organismes

Résumé du document

Les cellules ont une taille limitée à cause du rapport entre leur surface et le volume qui doit être assez important pour pouvoir optimiser les surfaces d'échanges pour que la cellule soit fiable. Plus la cellule est grande, plus son volume excède sa surface. C'est pour cela que les cellules des organismes complexes ne sont pas nécessairement plus grandes, mais plus nombreuses.

Extraits

[...] Inconvénients : les MO à fluorescence nécessitent des cellules fixées, des couches très minces et entrainent malheureusement des superpositions d'image. Usage : utilisé pour détecter la présence ou non d'un objet. Microscopie confocal On applique sur l'échantillon des anticorps fluorescents ou des colorants spécifiques de certaines structures. Un laser provoque la fluorescence de certains points situés à différents niveaux et profondeurs dans l'échantillon. Une analyse informatique permet de restituer une image en 3D. Avantages : meilleure résolution que le MO classique, et pas de superpositions d'images. [...]

[...] Biologie cellulaire : techniques d'observation des cellules I. Échelle des dimensions des systèmes biologiques La taille des cellules est liée à leur fonction mais de manière générale, les eubactéries mesurent entre 1 à 10 µm de diamètre tandis que les cellules procaryotes mesurent entre 10 à 150 µm de diamètre. Les cellules ont une taille limitée à cause du rapport entre leur surface et le volume qui doit être assez important pour pouvoir optimiser les surfaces d'échanges pour que la cellule soit fiable. [...]

[...] Inconvénients : ne permet pas d'observer des échantillons de faible épaisseur (quelques dizaines de nanomètres). Préparation conventionnelle de l'échantillon : - fixation chimique conserver une morphologie cellulaire la plus proche de la réalité ; Les fixateurs (éthanol, formaldéhyde) déshydratent les protéines et les précipitent en conservant leur forme. - inclusion imprégner les cellules d'une substance durcissante qui permettra une coupe fine et régulière ; l'échantillon est immergé dans une résine (epoxyde, aradyte) qui polymérise après chauffage. - réalisation des coupes ultra minces [...]

[...] - nettoyage de la réplique à l'aide d'acide ou d'eau de javel. La microscopie électronique à balayage (MEB) La MEB utilise un faisceau très fin qui balaie point par point la surface de l'échantillon. L'échantillon réémet certaines particules dont l'analyse permet de reconstruire en 3D de la surface. Il n'est plus nécessaire de métalliser les échantillons non conducteurs. L'observation peut être réalisée sous fort grossissement. Avantages : grossissement de 20 000×, résolution de 50 nm La profondeur de champ permet d'observer les reliefs d'échantillons massifs. [...]