Hydrolyse de saccharose, de l'amidon et condition de l'activité enzimatique

Résumé du document

Nous voulons déterminer la spécificité du substrat sur lequel une enzyme agit.
On prépare un extrait enzymatique de saccharase.

Dans des tubes à essais :
Tube n°1 : 2mL de Filtrat (enzyme) + 10mL de Saccharose
Tube n°2 : 2mL de Filtrat (enzyme) + 10mL de Maltose
Tube n°3 : 2mL de Filtrat (enzyme) + 10mL d'amidon
Tube n°4 : 2mL d'eau distillée + 10mL de Saccharose
Tube n°5 : 2mL de Filtrat (enzyme) bouilli + 10mL de Saccharose
Tous les produits sont ajoutés avec une pipette graduée.

Extraits

[...] Le tube est placé à avant mélange, dans un bain d'eau à 20°C. Le tube est placé à avant mélange, au bain marie. Puis on réalise des tests à l'eau iodée toutes les trois minutes : Dans le tube à aucune hydrolyse n'est constatée. Dans le tube à 20°C une hydrolyse très rapide est constatée. Et enfin dans le tube à une hydrolyse est constatée seulement au bout de plusieurs tests, donc elle est plus lente qu'à mais elle a tout de même était faite. [...]

[...] Nous constatons que dans le tube avec de la salive, il n'y a plus d'amidon, il y a eu hydrolyse de l'amidon. Contrairement au deuxième tube, il y encore de l'amidon. L'enzyme présente dans la salive, Amylase, agit sur l'amidon. TP : Condition de l'activité enzymatique : Le pH. Nous testons l'action de la pepsine sur l'ovalbumine. La manipulation se fait à 37°C et à des pH différents pour cela nous l'ajustons avec de l'acide chlorhydrique ou de l'hydroxyde de sodium. [...]

[...] Nous recommençons la même expérience avec une enzyme différente : Tube : 10mL d'ovalbumine + 1mL de pancréatine Tube : 10mL d'ovalbumine + 1mL de pancréatine + acide chlorhydrique Tube : 10mL d'ovalbumine + 1mL de pancréatine + hydroxyde de sodium Ces solutions sont opalescentes Au bout de quelques minutes, nous regardons les tubes à la lumière et nous découvrons que les tubes 1 et 2 sont toujours opalescents mais que le tube 3 est devenu translucide. Donc le pH est bien une condition pour l'activité enzymatique. La pancréatine agit dans un milieu légèrement basique. TP : Condition de l'activité enzymatique : La température. Nous voulons savoir si, comme le pH, la température est une condition à prendre en considération pour l'activité enzymatique. Dans 3 tubes à essais, nous introduisons de la salive fraîche et de l'empois d'amidon à 1%. [...]

[...] TP : L'hydrolyse de saccharose. Nous voulons déterminer la spécificité du substrat sur lequel une enzyme agit. On prépare un extrait enzymatique de saccharase. Dans des tubes à essais : Tube : 2mL de Filtrat (enzyme) + 10mL de Saccharose Tube : 2mL de Filtrat (enzyme) + 10mL de Maltose Tube : 2mL de Filtrat (enzyme) + 10mL d'amidon Tube : 2mL d'eau distillée + 10mL de Saccharose Tube : 2mL de Filtrat (enzyme) bouilli + 10mL de Saccharose Tous les produits sont ajoutés avec une pipette graduée. [...]